| 摘要 |
1. Способ получения пероксидазы хрена, включающий гомогенизацию корней хрена, экстракцию фермента, концентрирование ультрафильтрацией, осаждение белков сульфатом аммония, диализ осадка, отличающийся тем, что осадок белков диализуют против воды и 0,01-0,03 М раствора TEA-HCI буфера, с последующей очисткой пероксидазы от балластных белков на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой в том же буфере, а затем в 0,01-0,03 М растворе MOPS-NaOH буфера на колонке с КМ-целлюлозой, при значениях рН и рК буферов, близких к изоточке целевого продукта и концентрации буфера, обеспечивающей движение пероксидазы вниз по колонке по принципу адсорбции-десорбции со скоростью меньшей, чем у части балластных белков, имеющих одноименный заряд с зарядом на колонке, тогда как другая их часть остается на старте вследствие ионного обмена, очищенный целевой продукт диализуют против воды и 0,01-0,03 М NaCl, а затем лиофилизируют. ! 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что фермент после гомогенизации корней экстрагируют водой. ! 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что сульфат аммония вносят в концентрации 70-75% насыщения. ! 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что значения рН и рК буферов составляют 7,1-7,4 и 7,5-7,6 соответственно. |
