主权项 |
1.一种组织培养快繁细叶小羽藓配子体的方法,其特征在于,所述方法包括以下顺序步骤:a)切取细叶小羽藓配子体新生羽状分枝先端,进行表面灭菌,然后接种到改良Knop′s培养基上,进行培养10天,培养条件为:温度25±2℃,光照强度2000lx,光照时间10小时/天;所述改良Knop′s培养基配方为:改良Knop′s基本培养基+0~10g/l蔗糖;b)将步骤a)得到的无菌外植体转接到诱导新生配子体产生的培养基上,进行培养50天,培养条件为:温度(20~35)±2℃,光照强度3000lx,光照时间12小时/天;所述诱导新生配子体产生的培养基配方为:改良Knop′s基本培养基+0.1~2.0mg/l 6-苄氨基嘌呤+0.01~0.2mg/l萘乙酸+10g/l蔗糖;c)将步骤b)诱导培养得到的新生配子体切割剪碎,接种到配子体增殖扩繁的培养基上,进行培养50天,培养条件为:温度(20~35)±2℃,光照强度3000lx,光照时间12小时/天;所述配子体增殖扩繁的培养基配方为:改良Knop′s基本培养基+0~0.5mg/l 6-苄氨基嘌呤+0.05mg/l萘乙酸+10g/l蔗糖;所述改良Knop′s基本培养基的配方为:KNO3 250mg/l、MgSO4·7H2O250mg/l、KH2PO4 250mg/l、Ca(NO3)2·4H2O 1000mg/l、酒石酸氨0.115mg/l、NaFe-EDTA 36.7mg/l、MnSO4·4H2O 11.15mg/l、H3BO3 3.1mg/l、KI0.415mg/l、ZnSO4·7H2O 4.3mg/l、CuSO4·5H2O 0.0125mg/l、NaMoO4·2H2O 0.125mg/l、CoCl2·6H2O 0.0125mg/l。 |