一种用于单细胞凝胶电泳图像分析的样品制备方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于单细胞凝胶电泳图像分析的样品制备方法，包括铺胶、细胞裂解、解旋与电泳、中和洗涤、荧光染色步骤，其中所述铺胶步骤所铺制的凝胶为两层；所述荧光染色步骤采用非对称花青类染料即SGD染料溶液，所述SGD染料溶液是将SYBR Gold染料用二甲基亚砜以1∶10000的体积比稀释的溶液。本发明还提供一种专门用于实施上述样品制备方法的试剂盒，包括7种配置好的试剂及6片处理好的磨砂载玻片。本发明采用SGD染料溶液进行荧光染色，无毒无害，产生的实验废物不会污染环境，且具有更高的荧光灵敏度；所铺制的凝胶只有两层胶，与传统样品玻片要铺三层凝胶的工艺相比，样品制备工艺简单，易于操作，成功率高。

主权项

1、一种用于单细胞凝胶电泳图像分析的样品制备方法，包括铺胶、细胞裂解、解旋与电泳、中和洗涤、荧光染色步骤，其特征在于：所述铺胶步骤所铺制的凝胶为两层，是先将磨砂载玻片在38～42℃预热，然后将用不含钙、镁的磷酸缓冲溶液配制的1％常熔点琼脂糖凝胶均匀涂覆在磨砂载玻片上，并在低温下固化，得到铺有第一层凝胶的玻片；再将含有待测细胞的培养液与用不含钙、镁的磷酸缓冲溶液配制的0.8％低熔点琼脂糖凝胶在36～38℃温度下预热并混匀，再涂覆在所述铺有第一层凝胶的玻片上，盖上一个盖玻片，并置于低温下固化，然后移去盖玻片，得到铺有两层凝胶的玻片；所述荧光染色步骤采用SGD染料溶液。