发明名称 |
一种同时快速检测沙门菌和志贺菌的方法 |
摘要 |
本发明属于食源性致病菌的快速检测技术,具体说是一种对沙门菌和志贺菌同时进行检测的环介导等温DNA扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。包括由样品处理试剂、LAMP反应试剂、Bst DNA聚合酶的大片段、琼脂糖、溴酚蓝上样缓冲溶液、溴化乙锭溶液组成的试剂的配制,以及扩增产物的检测和沉淀产生的检测程序。其步骤是:首先设计特异性引物;其次是提取样品DNA;第三是配制反应体系。该法较之目前采用的传统细菌培养方法、免疫检测方法和其它分子生物学方法具有操作简单、快速、无需特殊仪器试剂且灵敏特异的优点。可应用于食品和其它样品中沙门菌和志贺菌的同时快速检测。 |
申请公布号 |
CN101603071A |
申请公布日期 |
2009.12.16 |
申请号 |
CN200810047994.7 |
申请日期 |
2008.06.12 |
申请人 |
陈福生;朱胜梅 |
发明人 |
陈福生;朱胜梅 |
分类号 |
C12Q1/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/10(2006.01)I |
代理机构 |
|
代理人 |
|
主权项 |
1.一种同时检测沙门菌和志贺菌的环介导等温DNA扩增方法,包括设计沙门菌invA基因和志贺菌ipaH基因特异性引物,其特征在于,其中沙门菌引物如下:invA-F3:5′-GCGATAATATGGGGCGGAAT;invA-B3:5′-CGCCTTTGCTGGT TTTAGGT;invA-FIP:5′-TCCCGGCAGAGTTCCCATTGAAATCATGACGCAGCTGTTGAA;invA-BIP:5′-TTCCCGCTGCCGGTATTTGTTGCTACGTTTTGCTTCACGGA;invA-LB:5′-GCCGTAACAACCAATACAAATGG;invA-LF:5′-TATTCGGTGGTTTTAAGCGTACTC;志贺菌引物为:ipaH-F3:5′-GCCTTTCCGATACCGTCTCT;ipaH-B3:5′-TGATGGACCAGGAGGGTT;ipaH-FIP:5′-TCCGCAGAGGCACTGAGTTTTTCACGCAATACCTCCGGATTC;ipaH-BIP:5′-TCGACAGCAGTCTTTCGCTGTTCCGGAGATTGTTCCATGTGA;ipaH-LB:5′-TGCAGCGACCTGTTCACG;ipaH-LB:5′-CTGCTGATGCCACTGAGAGC。 |
地址 |
430070湖北省武汉市狮子山一号华中农业大学食品科技学院 |