发明名称 侦测中间型类细菌,齿龈类细菌或牛放射病颗粒放射杆菌之物品,测试套组及夹层分析法
摘要 属于中间型类细菌,齿龈类细菌及牛放射病颗粒放射杆菌任一种微生物的一个或多个血清型可在一种夹层分析法中灵敏且特异地被侦测出。此一方法包括将一个含有从该微生物所提取之抗原的标本与一个具有反应性抗体附于其上之微细孔膜接触,其做为一种非水溶性之反应物,并将同一抗原与可侦测之标定抗体接触,因而形成一个连结于该膜之上的免疫夹层复合物。将未连结之物质清洗除去后,该连结之复合物可以正确地侦测之。该非水溶性反应物是由颗粒所组成,抗体被连结于其上。这些颗粒基本上是排列于膜之表面,而不被包埋于其中。此一分析法能使该微生物的侦测不与相关之病媒发生明显之交叉反应。
申请公布号 TW193720 申请公布日期 1992.11.01
申请号 TW079110799 申请日期 1990.12.22
申请人 伊士曼化学公司 发明人 布莱恩.艾.辛达;伊利沙白.安.葛洛根;保罗.伯纳.康特斯伯;约瑟夫.詹姆士.桑朋;约翰.盖瑞.费瑟;凯瑟林.特瑞沙.艾布蓝;贺莫.史坦利.雷诺斯
分类号 C12Q1/04 主分类号 C12Q1/04
代理机构 代理人 陈长文 台北巿敦化北路二○一号七楼
主权项 1.一种活体外用以判断中间型类细菌Bacteroidesintermedius,齿龈类细菌Bacteroides gingivalis或牛放射病颗粒放射杆菌Actinobacillusactinomycetemcomitans微生物之一或多个血清型的方法,包括以下之步骤:A.将一个怀疑含有提取自中间型类细菌,齿龈类细菌或牛放射病颗粒放射杆菌微生物之一或多个血清型之脂多醣、荚膜或膜蛋白抗原的水性标本与一个平均孔径从约0.5至约10微米并具有一种非水溶性试剂于其上之微细孔膜接触,该试剂含具有抗所称之抗原的抗体共价连接之非水溶性聚合颗粒,所称之试剂基本上皆在所称之膜的表面之上并与一种亲水性连接子混合。以便在所称之抗体和存在于所称之标本中的提取抗原之间形成一个非水溶性复合物于所称之膜上,B.在所称之步骤A的接触之前,或同时,或紧接着,将所称之提取抗原与一种对抗所称之抗原的可侦测标定水溶性抗体接触,以便在所称之膜上形成一个有所称之标定和非水溶性两种抗体与在所称之标本中的提取抗原之标定非水溶性免疫复合物,C.在步骤B的接触之同时或紧接着,自未复合之物质分离所称之标定非水溶性复合物,是以清洗所称之未复合之物质经过所称之微细孔膜,并且D.侦测在所称之膜上的所称之标定复合物,做为在所称之标本中存在有所称之抗原的一种指标。2.根据申请专利范围第1项之方法,用以侦测所称之微生物的单一个血清型。3.根据申请专利范围第1项之方法,用以各别侦测所称之微生物的所有血清型,其中每一个血清型的侦测是使用每一个血清型特定之一种非水溶性试剂在所称之膜的一个独立区中测得,其较整个表面区域为小。4.根据申请专利范围第1项之方法,用以在所称之膜的单一独立区中混合侦测所称之微生物的所有血清型。5.根据申请专利范围第1项之方法,其中所称之非水溶性颗粒之平均直径从大约0.01至大约10微米。6.根据申请专利范围第1项之方法,其中所称之非水溶性抗体和所称之标定抗体皆为多株的。7.根据申请专利范围第1项之方法,其中所称之可溶性抗体标定一种 ,放射性同位素或生物素。8.根据申请专利范围第7项之方法,其中所称之标定物为一种 。9.一种活体外用以判断中间型类细菌,齿龈类细菌或牛放射病颗粒放射杆菌微生物之一或多个血清型的方法,包括以下之步骤:A.从存在于一个生物性标本中之中间型类细菌,齿龈类细菌或牛放射病颗粒放射杆菌微生物之一或多个血清型提取脂多醣,荚膜或膜蛋白抗原,B.将所称之提取抗原与一个在一种用后即丢测试装置内的微细孔膜接触,所称之膜平均孔径从约0.5至约10微米并具有一种非水溶性试剂附着于其上,包括具有对抗所称之提取抗原的抗体共价连接于其上之聚合颗粒,所称之试剂基本上皆在所称之膜的表面之上并与一种亲水性连接子混合,以便在所称之提取抗原与存在于所称之膜上的所称之抗体间形成一个非水溶性免疫复合物,C.将所称之非水溶性复合物与一个 标定,水溶性之对抗所称之抗原的抗体接触,以形成一个为所称之标定和非水溶性两种抗体与在所称之膜上的所称之抗原的 标定,非水溶性免疫复合物,D.清洗未复合之物质通过所称之膜,并且E.将在所称之膜上的所称之标定复合物接触一种组合物,其当存在有所称之时提供一种染剂,以显示在所称之标本内存在有所称之抗原。10.根据申请专利范围第9项之方法,其中所称之微生物的每一个血清型可在所称之膜的一个独立区中各别侦测出。11.根据申请专利范围第9项之方法,其中所称之 为过氧化 ,且所称之染剂提供组合物包括一个三芳香基咪唑无色染剂,其当存在有过氧化 和过氧化氢时提供一种染色。12.根据申请专利范围第9项之方法,其中所称之膜所具有的孔隙大小从大约0.5至大约10微米,而所称之颗粒之平均直径从大约0.1至大约10微米。13.根据申请专利范围第9项之方法,其中所称之聚合颗粒至少有部份是从具有羰基,活性卤素,活化之2-取代乙基磺基或乙烯磺基之乙基化未饱和可聚合单体制备的。14.一种非水溶性物品,包括一个平均孔径从约0.5至约10微米之微细孔膜,至少在其一个表面上附着有一种非水溶性试剂,包括具有针对中间型类细菌,齿龈类细菌或牛放射病颗粒放射杆菌微生物之至少一个血清型的抗体共价连接之非水溶性聚合颗粒,所称之试剂基本上皆在所称之表面之上并与一种亲水性连接子混合。15.根据申请专利范围第14项之物品,其中所称之试剂为附着在一个独立区上,其较所称之膜的所称之表面整个区域为小。16.根据申请专利范围第14项之物品,其中所称之膜为一种微细孔聚醯胺膜。17.根据申请专利范围第14项之物品,其中所称之试剂其重量少于大约1%包埋于所称之膜内。18.根据申请专利范围第14项之物品,其中之非水溶性反应物分别具有针对所称之微生物的每一个血清型的抗体,为附着于所称之膜的所称之表面的各别独立区域。19.一种测试套组,用以侦测中间型类细菌,齿龈类细菌或牛放射病颗粒放射杆菌微生物之一个或多个血清型,其包括:a.一个非水溶性物品,包括一个平均孔径从约0.5至约10微米之微细孔膜,至少在其表面之一具有一种非水溶性试剂附着之,其包括具有针对中间型类细菌,齿龈类细菌或牛放射病颗粒放射杆菌微生物任一种之至少一个血清型的抗体共价连接之非水溶性聚合颗粒,所称之试剂基本上皆在所称之第一或第二表面之上并与一种亲水性连接子混合,以及b.针对中间型类细菌,齿龈类细菌或牛放射病颗粒放射杆菌之相同血清型的可侦测标定抗体,做为附着于所称之物品中的所称之非水溶性颗粒的抗体。20.根据申请专利范围第19项之套组,包括针对所称之微
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