两种抑制“肌肉生长抑制素基因”表达的合成小干扰RNA分子

摘要

本发明公布了两种抑制“肌肉生长抑制素基因”的合成小干扰RNA分子。发明涉及对肌肉抑制素基因产生显著抑制作用的体外合成小干扰RNA分子的设计、合成和抑制效果的评价。根据GeneBank中MSTN序列设计siRNA分子群，选择针对不同位点的8条siRNA序列进行合成，siRNA单链分子经退火、连接到pSilence4.1专一表达载体上，构建pSi-MSTN表达质粒。脂质体转染小鼠成肌细胞C₂C₁₂，建立最佳外源基因转染条件。转染48小时后收集C₂C₁₂细胞，提取总RNA，通过实时定量荧光PCR检测肌肉细胞MSTN mRNA表达水平，分析siRNA对MSTN的干扰抑制作用。分析比较实验组和对照组细胞MSTN表达水平与肌细胞生长的相关性，评价siRNA对MSTN基因表达的阻断作用和促进肌肉细胞增殖生长的作用，获得pSi-717和pSi-986两种有效抑制MSTN基因表达的siRNA分子载体。

主权项

1 两个针对肌肉生长抑制素基因编码区的干扰RNA序列。