一种纳米羟基磷灰石/丝素蛋白-壳聚糖复合支架的制备方法

摘要

一种纳米羟基磷灰石/丝素蛋白—壳聚糖复合支架的制备方法，属于组织工程技术领域。为了解决现有制备支架的方法引进了有毒的有机溶剂损害了材料的生物活性，材料内部结构气孔尺寸小气孔率低，气孔连通性不好，不利于骨细胞的粘附分化增殖生长等缺点，本发明的复合支架的材质由无机材料和有机材料复合而成，无机材料为纳米羟基磷灰石，有机材料为丝素蛋白和壳聚糖，无机材料和有机材料的重量比为50～70∶30～50，丝素蛋白和壳聚糖的重量比为1∶1～2，采用冷冻干燥方法制备上述支架。本发明细胞支架气孔率在75％～90％之间。气孔尺寸为150～500μm，气孔连通性良好，抗压强度为0.85～1.85Mpa之间。

主权项

1、一种纳米羟基磷灰石/丝素蛋白-壳聚糖复合支架的制备方法，其特征在于所述方法为：a、丝素蛋白溶于氯化钙/乙醇/水三元溶液中80℃裂解30min，三元溶液中氯化钙∶乙醇∶水的摩尔比率为1∶2∶8，稀释为0.2M的溶液；b、壳聚糖溶于1％W/V乙酸溶液中后，与丝素蛋白/氯化钙共溶液混合，壳聚糖与丝素蛋白的重量比为1∶1，搅拌均匀；c、0.2M磷酸氢二铵溶液滴入以上溶液，以氯化钙、磷酸氢二铵作为羟基磷灰石的先驱体，制备纳米羟基磷灰石/丝素蛋白-壳聚糖复合材料，Ca/P比设为1.67，氨水调节反应液的pH值为7.4，室温下机械搅拌反应2小时，静置陈化20h，离心沉淀，用蒸馏水和乙醇清洗，循环三次，真空干燥，得到纳米级弱结晶度的纳米羟基磷灰石/丝素蛋白-壳聚糖复合粉末；d、纳米羟基磷灰石/丝素蛋白-壳聚糖复合粉末加入蒸馏水，然后加入乙酸，使有机物的浓度介于2.5～10％W/V之间，超声分散30min，4℃放置2小时使其凝胶化，分别于-20℃预冷10～48h、-80℃预冷10～48h、-196℃的液氮中淬冷，然后冷冻干燥30h；即制得复合支架；所述复合支架的材质由无机材料和有机材料复合而成，无机材料为纳米羟基磷灰石，有机材料为丝素蛋白和壳聚糖，无机材料和有机材料的重量比为7∶3或5∶5；所述纳米羟基磷灰石的直径为4～6nm，长为20～40nm；所述复合支架的气孔率为75～90％，气孔尺寸为150～500μm。