利用微电极阵列阻抗生物传感器芯片检测肿瘤细胞的方法

摘要

本发明涉及一种利用微电极阵列阻抗生物传感器芯片检测肿瘤细胞的方法，利用纳米免疫磁微球富集分离技术俘获痰液或血液样品中的肿瘤细胞，形成磁微球-肿瘤细胞生物磁性组合体，借助外加磁铁产生磁力，将磁微球-肿瘤细胞生物磁性组合体在瞬间吸附于微电极阵列阻抗生物传感器芯片表面上，引起微传感电极的阻抗特性发生变化的原理，通过阻抗分析仪对微传感电极的阻抗特性进行并行扫描式测试，确定是否存在肿瘤细胞。本发明提供了一种无损、快速、简便的肿瘤细胞检测方法，适用于肿瘤早期诊断和治疗，也可对临床肿瘤患者的癌细胞转移复发进行诊断与监测，对重大疾病进行预测普查，同时可用于食品检测、药物筛选等领域。

主权项

1、一种利用微电极阵列阻抗生物传感器芯片检测肿瘤细胞的方法，其特征在于包括如下步骤：1)采用由4个微电极阵列检测单元构成的微电极阵列阻抗生物传感器芯片，每个微电极阵列检测单元包括支撑层、基底层、微传感电极层、绝缘层和储液池五层结构；所述微传感电极层有1～100个通道的微传感电极，每个微传感电极的尺寸范围为10μm～50μm，微传感电极间距为10μm～30μm；2)提取1-5毫升的痰液或血液样品，加入到微电极阵列阻抗生物传感器芯片储液池中，经液化处理后，再提取1-5ul A型特异性蛋白质抗原加入到微电极阵列阻抗生物传感器芯片储液池中，使储液池中痰液或血液样品中的肿瘤细胞被A型特异性蛋白质抗原所修复，形成A型特异性蛋白质抗原-肿瘤细胞生物组合体；3)将一种B型特异性蛋白质抗体修复到Fe3O4磁性微球上，经3-10分钟免疫反应，形成抗体-磁微球，再将这种抗体磁微球1-5ul加入到微电极阵列阻抗生物传感器芯片储液池中，使抗体-磁微球俘获储液池中的A型特异性蛋白质抗原-肿瘤细胞生物组合体，并在25-30℃进行免疫反应，反应时间2-6分钟，反应后形成磁微球-肿瘤细胞生物磁性组合体；4)在微电极阵列阻抗生物传感器芯片支撑层下方通过施加磁铁产生磁力，使磁微球-肿瘤细胞生物磁性组合体全部吸附到微电极阵列阻抗生物传感器芯片表面上；借助微型三电极体系，以微传感电极为工作电极，以微型铂电极为对电极，以微型Ag/AgCl电极为参考电极，通过阻抗分析仪对微传感电极的阻抗特性进行并行扫描式测试，探测确定是否存在肿瘤细胞。