检测靶核酸的方法

摘要

本发明提供了一种检测靶核酸的方法，其包括检查洗涤步骤是否已经正常进行的步骤。在本发明的一个方面，使用用于监测洗涤水平的监测核酸探针。通过在洗涤靶核酸的最佳温度范围内和在洗涤的最佳温度范围附近的温度范围内的不同洗涤温度进行洗涤，所述探针显示出信号强度的变化。

主权项

1.一种检测靶核酸的方法，其特征在于，包含：制备靶核酸和用于监测洗涤水平的监测核酸，所述靶核酸包含靶序列，且所述监测核酸包含不与靶序列或靶序列的互补序列杂交的序列，将所述靶核酸和监测核酸提供给包含靶序列的互补序列的核酸探针和监测核酸探针，以监测洗涤水平，所述监测核酸探针包含监测核酸所含的序列的互补序列，从而使靶核酸与核酸探针杂交，且使监测核酸与监测核酸探针杂交；洗涤在上述步骤中产生的杂种，以去除非特异性杂种，分别测量来自与靶核酸杂交的核酸探针的信号强度和来自与监测核酸杂交的监测核酸探针的信号强度，和检查洗涤步骤是否正常进行；其中所述监测核酸探针显示出与监测核酸杂交且随后在洗涤的最佳温度范围和该范围附近的改变的洗涤温度洗涤后信号强度的变化，预先基于从已经与监测核酸杂交且随后在洗涤的最佳温度范围洗涤的监测核酸探针得到的信号强度，确定具有上下限的洗涤的最佳信号强度范围，且所述检查步骤包含作出下述判断：当从与监测核酸杂交的监测核酸探针得到的信号强度是在洗涤的最佳信号强度范围内时，洗涤已经正常进行，和当所述信号强度是在洗涤的最佳信号强度范围外时，洗涤步骤中存在异常。