一种烟草赤星病菌的保存方法

摘要

本发明公开了一种烟草赤星病菌的保存方法。采集田间典型的赤星病斑用简易单孢法分离病菌孢子，离体叶片悬滴法筛选强致病力菌株，强致病力菌株孢子液喷雾接种烟叶，接种叶片保湿，并维持湿度发病，取病斑，晾干或烘干，干病斑2～4℃冰箱密封保存。其中，典型赤星病斑以及作为菌种低温保存的病斑，均可适用。这种采用寄主植物保存病菌的方法，可有效保持病菌的致病力。配合简易单孢分离可在保湿病斑后方便制备遗传稳定的新鲜孢子。该方法可保存病菌至少5年，能够有效保持病菌的遗传稳定性和致病力的一致性。

主权项

1、一种烟草赤星病菌的保存方法，包括以下步骤：(1)采集田间典型的赤星病斑，保湿培养2～3天，采用简易单孢法分离病斑上的病菌孢子；(2)采用离体叶片悬滴法筛选强致病力菌株；(3)将筛选获得的菌株黑暗培养产孢后制备成1.5～4.5×10万个/ml的孢子液，喷雾接种打顶、保留脚叶的烟草植株上的所有叶片；(4)接种叶片后，喷灌或半沟灌保湿2～3天，并维持80～90％的相对湿度、20～30℃环境15～20天，待病斑占叶面积20～30％、病斑彼此不相连时，采摘中上部叶片；(5)取病斑，自然晾干或35℃烘干或2～4℃脱水干燥；(6)将干燥的病斑置2～4℃冰箱密封保存。