结合分子

摘要

本发明涉及到对V_H区进行工程改造以改善其溶解性和稳定性的方法。本发明可供用于将基于三维结构信息的限定氨基酸取代引入到重链基因座的V片段中，在非人类哺乳动物中表达该基因座，并筛选可溶性V_H区。进一步稳定或可溶的突变可以因体内B细胞成熟中亲和力成熟而被引入。

主权项

1.生产仅重链抗体的方法，包括：用抗原攻击含重链基因座的非人类哺乳动物，该重链基因座：包含多个V基因片段，其编码一个或多个(i)位于VL界面以降低疏水性和(ii)位于其它位置以克服结构不稳定性的氨基酸突变；包含至少一个D基因片段和至少一个J基因片段；缺失编码CH1功能区的基因片段或已被工程化以阻止功能性CH1功能区表达；和在应答抗原攻击时表达，产生缺失CH1且具有由VH基因编码的可溶性VH区的仅重链抗体，其中该VH基因包含由于VDJ重排和亲和力成熟而被掺入所述VH基因的优选V基因片段。