同时测定蜂王浆中多种硝基咪唑类药物残留量的检测方法

摘要

本发明涉及蜂王浆中硝基咪唑类药物残留量的方法，尤其涉及采用液相色谱-质谱/质谱法测定蜂王浆中羟基甲硝唑、2-甲硝咪唑、羟基二甲硝咪唑、甲硝唑、二甲硝咪唑、洛硝哒唑、氯甲硝咪唑、苯硝咪唑、羟基异丙硝唑和异丙硝唑等硝基咪唑类药物残留量的方法。同时测定蜂王浆中多种硝基咪唑类药物残留量的检测方法，本发明采用甲醇沉淀蛋白，提取，再采用HLB固相萃取小柱和C₁₈固相萃取小柱净化，采用色谱-质谱/质谱仪测定。本发明具有专属性强、灵敏度高、结果准确的特点，不仅测定硝基咪唑原药还包括一些代谢产物，方法的测定低限10μg/kg，测定低限满足目前国内外对蜂王浆中硝基咪唑类药物残留量的要求。回收率范围为70.7％～105.0％；相对标准偏差小于12.7％。

主权项

1.同时测定蜂王浆中多种硝基咪唑类药物残留量的检测方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：①提取：称取试样置于具塞离心管中，加同位素内标溶液，加水，混匀，静置，再加甲醇沉淀蛋白，于旋涡混合器上混匀，离心，过滤，移取上清液，加磷酸盐缓冲溶液稀释，混匀，加氯化钠和有机溶剂提取，样品残渣再加入有机溶剂，重复上述操作，合并提取溶液，水浴浓缩至近干；②净化：加水溶解残渣并将溶液转移至HLB固相萃取小柱中，弃去流出液，抽干，用甲醇洗脱，收集全部洗脱液于另一离心管中，洗脱液水浴下浓缩至近干；再用甲醇溶解将溶液转移至C18固相萃取小柱中，洗脱，收集全部洗脱液于另一离心管中，洗脱液水浴下浓缩至近干，用甲醇-0.15％(V/V)甲酸溶液的混合液溶解残渣定容，混匀，溶液过滤膜，供液相色谱-质谱/质谱仪测定；③色谱-质谱/质谱仪测定：标准工作液和样品溶液在液相色谱-质谱/质谱条件中分别进样，以质量浓度X为横坐标，峰面积的比值Y为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量；样品溶液中出现的质量色谱峰保留时间与混合基质标准工作液一致，允许偏差小于±2.5％，该色谱峰所对应的药物质谱定性离子的相对丰度与浓度相当混合基质标准工作液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过规定，则可确定含有该药物。