结核分枝杆菌快速检测的方法

摘要

本发明公开了一种结核分枝杆菌快速检测的方法，它包括：1.将经过修饰的荧光蛋白基因和结核分枝杆菌启动子基因整合到结核分枝杆菌噬菌体内；2.取患者痰等标本用2～5倍的消化液室温消化10～50分钟，离心机离心10～30分钟，除上清液，用PBST缓冲液稀释沉淀后备用；3.取第二步中处理后的标本置于容器内，同时用缓冲液做空白试验，向标本和缓冲液中分别添加经过重组的结核分枝杆菌噬菌体，37度温育1～6小时；4.用荧光扫描仪在280～600nm波长下分别对标本和空白对照进行荧光强度检测即可。整个检测过程在4～6小时即可得到结果，而且不同标本的检测在同一个板子上实现，荧光检测同步进行，能够实现快速和高通量。

主权项

1、一种结核分枝杆菌快速检测的方法，其特征在于：它包括下述步骤：第一步，结核分枝杆菌噬菌体的重组：将5端用一个强启动子修饰的荧光蛋白基因和结核分枝杆菌启动子基因整合到结核分枝杆菌噬菌体内；第二步，标本中结核分枝杆菌的富集：取患者痰标本，用2～5倍的消化液室温消化10～50分钟，在离心机内离心10～30分钟，去除上清液，用缓冲液稀释沉淀后备用；第三步，用重组的噬菌体感染标本中的结核分枝杆菌：取第二步中处理后的标本置于容器内，同时用缓冲液做空白试验，向标本和缓冲液中分别添加第一步得到的经过重组的结核分枝杆菌噬菌体，37度温育1～6小时；第四步，检测荧光强度：用荧光扫描仪在280～600nm波长下分别对标本和空白对照进行荧光强度对照检测即可。