一种广泛胁迫蛋白家族基因特异分子标记的开发及应用

摘要

本发明以大麦品种Steptoe和Morex的USP基因的部分DNA序列为基础，通过DNAMAN 5.11软件比对这两种材料的基因序列来寻找碱基突变、插入和缺失的区域，利用这些差异区域设计引物，使Steptoe和Morex这两份材料中只有一份材料可以扩增出目标条带，通过PCR扩增检测待测DH群体材料的扩增目标条带的情况，然后按照Mapmaker3.0软件的要求整理数据。使用Mapmaker3.0软件把USP基因定位到染色体上，利用大麦DH群体抗性QTL图谱和实时荧光定量PCR技术分析USP基因与抗性间的联系，通过转基因技术或染色体工程技术将该基因导入作物中，可有效增强生物本身抵抗外界压力的能力，使作物自身的抵抗能力显著增强。

主权项

1、一种广泛胁迫蛋白家族基因特异性分子标记的开发，它是以大麦品种Steptoe和Morex的USP基因的部分DNA序列为基础，根据序列中碱基突变、插入和缺失的差异区域设计的特异性差异扩增引物，其特征在于：所述引物是分别以SEQ ID No.1和SEQ ID No.2或SEQ ID No.3和SEQ ID No.4或SEQ ID No.5和SEQ ID No.6或SEQ ID No.7和SEQ ID No.8或SEQ ID No.9和SEQ ID No.10的DNA序列为基础，根据差异区域设计的具有下列碱基组成的特定序列寡聚体：(1)正向：5’-GTCCTTAATTGTTCCTGCGTC-3’；反向：5’-CCATATGGCGAACCGAAATC-3’。或(2)正向：5’-CTCTGGCAGACATGGCAGC-3’；反向：5’-AGAGATAACTGAGGAAAACACACTG-3’。或(3)正向：5’-CTTAACCAACTAACCAAGGAGAT-3’；反向：5’-CATGAGTACAGTAGATGGTTGGG-3’。或(4)正向：5’-TTAAAGCCAAAGCAAGCCGT-3’；反向：5’-GCTCGTAGTCGATCCATCAAC-3’。或(5)正向：5’-AGAAGGGAGGAGGAGGTGATG-3’；反向：5’-GCTTTTATAGAAACACGGTCG-3’。