发明名称 |
一种检测狂犬病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用 |
摘要 |
本发明公开了一种检测狂犬病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用,该试剂盒含有:a)RNA抽提液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)RNA酶抑制剂、e)引物和TaqMan探针、f)标准阳性DNA模板、g)PCR荧光定量反应液,其特征是:引物序列分别为正义引物:5′-TAGGATGCTATATGGGTCAAGTCAGA-3′,反义引物:5′-TTCAAATGTCCCTTTCCCGAAGAA-3′,扩增子大小为125bp,荧光探针序列为:5′-FAM-CAACGGTTATTGCTGCATGTGCTCCTCA-TAMRA-3′,探针的5’端标记荧光发射基团FAM,3’端标记荧光淬灭基团TAMRA,标准阳性DNA模板由已插入狂犬病毒N蛋白区391bp片段的pGEM-T载体转化大肠杆菌DH5α,增殖后提取质粒,并于紫外分光光度计测A<sub>260</sub>定量并10倍梯度稀释。高效方便地对血清制品中的狂犬病毒的污染进行实时监控,还能为相关基础研究提供技术支持,应用前景十分广泛。 |
申请公布号 |
CN101565758A |
申请公布日期 |
2009.10.28 |
申请号 |
CN200910062397.6 |
申请日期 |
2009.06.02 |
申请人 |
武汉三利生物技术有限公司 |
发明人 |
郑从义;郭佳;徐国东;张国荣 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
武汉宇晨专利事务所 |
代理人 |
王敏锋 |
主权项 |
1、一种检测狂犬病毒的荧光定量PCR试剂盒,该试剂盒含有:a)RNA抽提液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)RNA酶抑制剂、e)引物和TaqMan探针、f)标准阳性DNA模板、g)荧光定量PCR反应液,其特征在于:引物序列分别为正义引物:5′-TAGGATGCTATATGGGTCAAGTCAGA-3′,反义引物:5′-TTCAAATGTCCCTTTCCCGAAGAA-3′,扩增子大小为125bp,荧光探针序列为:5′-FAM-CAACGGTTATTGCTGCATGTGCTCCTCA-3′,探针的5’端标记荧光发射基团FAM,3’端标记荧光淬灭基团TAMRA,标准阳性DNA模板由已插入狂犬病毒N蛋白区391bp片段的pGEM-T载体转化大肠杆菌DH5α,增殖后提取质粒,并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。 |
地址 |
430223湖北省武汉市东湖开发区庙山桃源街7号 |