一种黄单胞菌生产高黏度黄原胶的发酵方法

摘要

本发明公开一种黄单胞菌生产高黏度黄原胶的发酵方法，涉及利用微生物发酵工程生产黄原胶技术领域。传统的黄单胞菌生产黄原胶的发酵方法，包括斜面母种、摇瓶培养、种子罐培养、全培养基发酵培养、发酵液提取阶段；本发明将发酵培养阶段设计为基础培养基发酵培养阶段包括补料培养基A流加、料培养基B流加、pH调控环节。在严格控制发酵液光密度的情况下依次分两步流加淀粉和含有淀粉质粗农产品，逐步增加碳氮比，通过酸碱中和液控制发酵pH值，达到了将工艺发酵时间从60-75小时缩短至40-48小时，高成本的工业原料改进为低成本的初农产品替代，原料成本降低15～20％，发酵时间缩短使能源消耗降低25～30％，通过试验数据表明，原料转化率达到85～90％，黏度提高10～20％。

主权项

1、一种黄单胞菌生产高黏度黄原胶的发酵方法，包括斜面母种、摇瓶培养、种子罐培养、全培养基发酵培养、发酵液提取阶段，其特征在于：全培养基发酵培养阶段设计为基础培养基发酵培养阶段包括补料培养基A流加，补料培养基B流加、PH调控环节，具体步骤如下：(1)根据黄单胞菌可以充分快速利用单糖和水解蛋白等碳、氮源培养基，作为发酵培养基快速增殖黄单胞菌的原理，首先配制基础培养基，其基础培养基组分(g/L重量体积比)与制备为：葡萄糖10；水解大豆蛋白胨1；尿素2，玉米浆干粉3；K2HPO4 5，柠檬酸1，MgSO4·7H2O 0.3，CaCO3 3，121℃20min灭菌，灭菌后NaOH调PH至6.5~7.5，装料系数0.6；(2)将级联放大培养后的黄单胞菌液体(菌种号CICC10258)接种至基础发酵培养基中，接种量10％(体积比)，pH值控制在6.5~7.5，温度30℃，发酵时间持续8~12小时；补料培养基A和补料培养基B的组分(g/L重量体积比)与制备为：a、补料培养基A玉米淀粉120，玉米浆干粉60，柠檬酸2；b、补料培养基B玉米粉300，柠檬酸2；培养温度：30℃，培养pH值6.5~7.5；培养方式：耗氧培养；培养基采用上述组分，均121℃，20min灭菌制备；(3)用补料流加的方式按一定速率补加补料培养基A和补料培养基B到基础发酵培养基中，在其发酵液菌体繁殖到光密度为OD600条件下将补料培养基A一次性补入发酵液中，发酵时间持续6~8小时即发酵过程前期；在补料培养基A按以上步补料结束后，即使用补料培养基B开始流加补料，快速流加补料16~20小时后将补料培养基B一次性补入发酵液中，同时将发酵液PH值调节到4.5~5.5培养，发酵时间持续持6~8小时即发酵末期结束发酵。