海雀稗耐寒体细胞突变体筛选方法

摘要

本发明公开了一种海雀稗耐寒体细胞突变体筛选方法，属于植物培养方法，其是以海雀稗的颗粒状胚性愈伤组织为材料，在细胞水平上进行低温培养和耐寒筛选，从经过耐寒筛选的细胞再生出植株；颗粒状愈伤组织在附加2，4-二氯苯氧乙酸2.0mg/L、6-苄基氨基嘌呤0.05mg/L的愈伤组织继代培养基上增殖培养，用作低温培养的材料；在0℃低温条件下，培养60d的愈伤组织转到附加6-苄基氨基嘌呤2.0mg/L的愈伤组织分化培养基上，绿苗分化率为23％。绿苗在附加6-苄基氨基嘌呤2.0mg/L的愈伤组织分化培养基上继续生长，发育成具有根、茎、叶的完整再生植株。本发明适宜用于植物新品种选育，为在细胞水平上开展植物体细胞突变体育种提供条件。

主权项

1、海雀稗耐寒体细胞突变体筛选方法，其特征是：1)材料选用海雀稗的颗粒状胚性愈伤组织为材料，0℃为低温筛选压；2)培养基基本培养基由MS大量元素、MS微量元素与B5维生素组成，添加蔗糖30g/L；愈伤组织继代培养基是在基本培养基中附加以下激素组成：2，4-二氯苯氧乙酸2.0mg/L，6-苄基氨基嘌呤0.05mg/L，琼脂条16g/L；愈伤组织分化培养基是在基本培养基中附加以下激素组成：6-苄基氨基嘌呤2.0mg/L，琼脂条8g/L；上述培养基在高压灭菌前用氢氧化钠和盐酸调整pH值至5.8；3)方法将颗粒状胚性愈伤组织在愈伤组织继代培养基上进行增殖培养，用作低温处理材料；冰箱温度设置为0℃，培养时间为60d；经过低温培养和筛选的愈伤组织转移到愈伤组织分化培养基上形成绿苗；绿苗再转移到愈伤组织分化培养基上，发育成具有根、茎、叶的完整再生植株。