促胰岛素肽合成

摘要

本发明涉及促胰岛素肽的制备，所述促胰岛素肽利用固相和溶液相(“杂合”)方法合成。一般地，所述方法包括利用固相化学合成3种不同的肽中间体片段。然后，利用溶液相化学将额外的氨基酸物质添加到片段中的一个上。然后，将所述片段在固体溶液相中偶联在一起。在一个片段中使用假脯氨酸使得所述片段的固相合成更容易，并且还使得将这一片段偶联到其它片段的后续的溶液相更容易。本发明非常有效地用于制成促胰岛素肽如GLP-1(7-36)以及它的天然的和非天然的负体。

主权项

1.一种制备促胰岛素肽的方法，所述方法包括下述步骤中的一步或多步：h)提供包括氨基酸序列HX8EX10(SEQ ID NO.6)的第一肽片段，其中X8和X10分别是非手性氨基酸残基，H和E中的每一个任选地包含侧链保护；i)提供包括氨基酸序列TFTSDVX17-18YLEG(SEQ ID NO.8)的第二肽片段，其中由符号X17-18表示的残基是假脯氨酸的二肽残基，该序列的所述氨基酸残基任选地包含侧链保护；j)将所述第一片段与所述第二片段偶联，以提供包括氨基酸序列HX8EX10TFTSDVX17-18YLEG(SEQ ID NO.11)的第三肽片段，其中该序列的所述氨基酸残基任选地包含侧链保护；k)提供包括氨基酸序列QAAKEFIAWLVKX35(SEQ ID NO.9)的第四肽片段，其中X35是非手性氨基酸残基，该序列的所述氨基酸残基任选地包含侧链保护；l)将所述第四肽片段与精氨酸偶联，以提供包括氨基酸序列QAAKEFIAWLVK X35R(SEQ ID NO.12)的第五肽片段，该序列的所述残基任选地包含侧链保护；和m)将所述第五片段与所述第三片段偶联，以提供包括氨基酸序列HX8EX10TFTSDVX17-18YLEGQAAKEFIAWLVK X35R(SEQ ID NO.13)的促胰岛素肽，该序列的所述残基任选地包含侧链保护。