重组人HMBOX1表达载体以及该载体表达产物及其抗体与应用

摘要

本发明涉及重组人HMBOX1表达载体以及该载体表达产物及其抗体与应用，属基因工程技术领域。本发明详细阐述了人HMBOX1表达载体的构建、HMBOX1表达产物的制备及、HMBOX1表达产物的抗体的制备，可以进一步了解HMBOX1的生化性质和特点，深入研究HMBOX1的蛋白三级构象。利用重组人HMBOX1表达载体的表达产物制备的抗人HMBOX1蛋白抗体不仅可以用于研究人HMBOX1蛋白在人体各组织中的表达情况，还可以对HMBOX1在疾病中的差异表达作进一步分析。另外，此抗体可应用于HMBOX1在细胞信号传导中的机制研究，阐明HMBOX1蛋白的结合位点以及和其它转录因子的相互作用。

主权项

1、一种重组人HMBOX1表达载体，通过如下步骤构建制得：(1)从人自然杀伤细胞系NK92细胞中扩增得到人HMBOX1基因，其序列为SEQ ID NO.1所示；(2)将步骤(1)制得的人HMBOX1基因与pGEM easy T载体连接构建成pGEM-HMBOX1；(3)以步骤(2)制得的pGEM-HMBOX1为模板进行PCR扩增，设计引物时分别在5’端和3’端设计BamH I和Hind III酶切位点，得扩增产物，扩增产物序列为SEQ ID NO.2所示；(4)将步骤(3)制得的扩增产物经BamH I和HindIII双酶切后与载体pET22b连接，构建得到表达产物C端带有6×Histidine标签的pET22b-HMBOX1表达基因载体，并转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中，得到重组人HMBOX1表达载体。