重组人睫状神经营养因子突变体及其制备方法

摘要

本发明涉及重组蛋白与其制备方法，具体涉及重组人睫状神经营养因子(简称rhCNTF)突变体及其制备方法，更具体的说，本发明涉及用乳糖诱导rhCNTF突变体在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶表达、并从中加以分离纯化的方法，以及通过该方法制备的rhCNTF突变体。

主权项

1.一种制备rhCNTF突变体的方法，包括下列步骤：(a)将序列如SEQ ID NO.1的rhCNTF突变体基因序列克隆入表达载体以得到重组载体，并导入大肠杆菌中，生成含有重组载体的基因工程菌；(b)培养基因工程菌至A600＝12～14时，加入乳糖，诱导rhCNTF突变体在基因工程菌中可溶性表达；(c)诱导后，向培养液中缓慢加入葡萄糖作为主要碳源，并控制培养液中溶解氧值为10～15％，继续培养；(d)待基因工程菌的A600＝20～30时，收获菌体，并将菌体破碎得到破菌液；(e)纯化破菌液，得到纯化产品。