一种染色体22q11.2区微缺失、微重复的测定方法

摘要

本发明属于生物工程领域，公开了一种染色体22q11.2区微缺失、微重复的测定方法。该方法的步骤包括：抽提基因组DNA；进行多重荧光定量PCR复合扩增，复合扩增体系中包括了5个STR标记：D22S873，22D_5_1，22D_4_5，2D_4_4，22D_4_3和一个内参G6PDH；取PCR扩增产物变性使双链产物转化为可为毛细管电泳分析的单链，采用毛细管电泳对上述变性产物进行产物长度和产物量分析；采用量比值分析的方法和/或采用峰的位置及数量分析的方法判断是否为正常、微缺失或微重复。该方法可提高检测的可靠性，缩短检测时间，降低检测成本，便于临床大规模使用。

主权项

1、一种染色体22q11.2区微缺失、微重复的测定方法，其特征在于该方法包括下列步骤：a.抽提基因组DNA；b.多重荧光定量PCR复合扩增：复合扩增体系中包括了5个STR标记：D22S873，22D_5_1，22D_4_5，22D_4_4，22D_4_3和一个内参G6PDH；进行PCR扩增；c.取PCR扩增产物变性使双链产物转化为可为毛细管电泳分析的单链，采用毛细管电泳对上述变性产物进行产物长度和产物量分析；d.结果分析：1)根据下列公式计算量比值：量比值0.7～1.3为正常二倍体个体；量比值小于0.7为存在微缺失的个体；量比值大于1.3为存在微重复的个体；和/或2)根据峰的位置和数量进行判断，微缺失为在相应位置缺少峰；微重复有三种情形：相应位置出现峰高等于或接近1∶1∶1的三个峰、出现峰高等于或接近2∶1的二个峰、出现峰高等于或接近1∶2的二个峰；其中：D22S873的上游引物序列为SEQ ID NO.1，下游引物序列为SEQ ID NO.2；22D_5_1的上游引物序列为SEQ ID NO.3，下游引物序列为SEQ ID NO.4；22D_4_5的上游引物序列为SEQ ID NO.5，下游引物序列为SEQ ID NO.6；22D_4_4的上游引物序列为SEQ ID NO.7，下游引物序列为SEQ ID NO.8；22D_4_3的上游引物序列为SEQ ID NO.9，下游引物序列为SEQ ID NO.10；G6PDH的上游引物序列为SEQ ID NO.11，下游引物序列为SEQ ID NO.12。