发明名称 |
一种检测活病毒滴度的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种检测活病毒滴度的方法,包括:(1)将稀释的待检病毒感染二倍体细胞或其他贴壁细胞,培养、固定;(2)向固定的细胞中加入病毒抗血清(一抗),培养、洗涤,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗,培养后洗涤,加入显色液显色,产生红色或褐色斑点;或者向固定的细胞中加入HRP标记的病毒抗血清,培养后洗涤,加入显色液显色,产生红色或褐色斑点;(3)根据红色或褐色斑点数和稀释倍数计算病毒滴度;或者根据稀释度和产生斑点孔数,计算病毒的1gTCID50值。本发明检测方法可适用于各种活病毒滴度的检测,检测速度快,可缩短病毒滴度检测时间;特异性好,免疫斑点是特异免疫反应所致;不需光学或荧光显微镜等专业仪器设备和其他试剂,检测成本低,操作简便。 |
申请公布号 |
CN101545907A |
申请公布日期 |
2009.09.30 |
申请号 |
CN200810102905.4 |
申请日期 |
2008.03.28 |
申请人 |
北京万泰生物药业股份有限公司 |
发明人 |
李益民;叶祥忠 |
分类号 |
G01N33/577(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I;G01N21/78(2006.01)I |
主分类号 |
G01N33/577(2006.01)I |
代理机构 |
北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 |
代理人 |
孙皓晨;费碧华 |
主权项 |
1、一种检测病毒滴度的方法,包括:(1)将稀释的待检病毒感染贴壁细胞、培养后,用固定剂固定细胞;(2)向已固定的细胞中加入病毒抗血清或单克隆抗体,培养、洗涤,加入辣根过氧化物酶标记的二抗,加入显色剂显色,产生红色或褐色斑点;或者向固定的细胞中加入辣根过氧化物酶标记的病毒抗血清或单克隆抗体,培养、洗涤,加入显色剂显色,产生红色或褐色斑点;(3)根据以下公式计算病毒滴度:病毒滴度=红色或褐色斑点均数×待检测病毒的稀释倍数÷待检测病毒感染贴壁细胞的剂量,待检测病毒感染贴壁细胞的剂量单位为毫升;或者根据稀释度和产生斑点的孔数,计算病毒的1gTCID50值。 |
地址 |
102206北京市昌平区科学园路31号 |