微量mRNA的扩增方法及其应用

摘要

本发明为了提供不受碱基序列长度的影响而不论是短的mRNA还是长的mRNA都可同样有效率地扩增的微量mRNA的扩增方法及其应用方法，本发明的微量mRNA的扩增方法包括：向包含微量mRNA的溶液添加虚拟RNA制作混合溶液的第一工序；根据使用混合溶液作为模板的逆转印反应，合成反义DNA的第二工序；对合成后的反义DNA合成互补的正义DNA，形成由正义DNA和反义DNA组成的双链DNA的第三工序；在所形成的双链DNA的正义DNA的5’末端侧连接RNA聚合酶的启动子序列制作扩增用双链DNA的第四工序；以及通过RNA聚合酶，由扩增用双链DNA扩增RNA的第五工序。

主权项

1. 一种微量mRNA的扩增方法，其特征在于包括：向包含微量mRNA的溶液添加虚拟RNA制作混合溶液的第一工序；根据使用混合溶液作为模板的逆转印反应，合成反义DNA的第二工序；对合成后的反义DNA合成互补的正义DNA，形成由正义DNA和反义DNA组成的双链DNA的第三工序；在所形成的双链DNA的正义DNA的5’末端侧连接RNA聚合酶的启动子序列制作扩增用双链DNA的第四工序；以及通过RNA聚合酶，由扩增用双链DNA扩增RNA的第五工序。