特异性抑制特定DNA模板扩增的方法和基于该方法的一步定点诱变方法

摘要

本发明涉及一种特异性抑制特定DNA模板扩增的方法和基于该方法的一步定点诱变方法。所述特异性抑制特定DNA模板扩增的方法通过控制PCR扩增反应体系的温度可以特异性抑制特定模板DNA的扩增。而所述一步定点诱变方法将至少一条诱变引物和两条侧翼引物与其他PCR成分一次加入同一反应管后，通过PCR反应直接获得诱变的扩增DNA片段，而且诱变效率几乎为百分之百。

主权项

1.一种特异性抑制特定DNA模板扩增的方法，该方法通过控制PCR扩增反应体系的变性温度为按照以下定义的Tra±2℃，使得反应体系中的模板DNA特异性双链化，而反应体系中的其余DNA不能同时实现双链化：若(Gi+Ci)％＜(G+C)％，Tra＝{0.41*(Gi+Ci)％-[(Ai+Ti)％-(A+T)％]}*100+69.3若(Gi+Ci)％＞(G+C)％，Tra＝0.41*(Gi+Ci)％*100+69.3-4.1其中，上述的Ai、Ti、Gi、Ci是指目的DNA所扩增区段的碱基；A、T、G、C是指模板DNA的碱基。