发明名称 |
基因工程重组牛白细胞介素-2的复性方法 |
摘要 |
本发明提供重组牛白介素-2的脲浓度梯度复性方法及用于该方法的试剂盒。利用该复性方法,复性液中重组牛白介素-2的复性率可达50%以上,活性测定效价可达9.6×10<sup>4</sup>IU/mL。 |
申请公布号 |
CN100540563C |
申请公布日期 |
2009.09.16 |
申请号 |
CN200610024993.1 |
申请日期 |
2006.03.23 |
申请人 |
上海市农业科学院 |
发明人 |
李震;李祥瑞;于瑞嵩;黄建珍;徐立新;沈世缘 |
分类号 |
C07K1/00(2006.01)I;C07K1/06(2006.01)I;C07K14/54(2006.01)I |
主分类号 |
C07K1/00(2006.01)I |
代理机构 |
上海专利商标事务所有限公司 |
代理人 |
徐 迅 |
主权项 |
1.一种重组牛白介素2的复性方法,该方法包括:a)将重组牛白介素2的包涵体经变性后在基本上由30-100mmol/LTris-HCl、3.5-4.5mol/L尿素、0.5-1mol/L盐酸胍、0.3-0.7mol/L L-Arg、1∶3-3∶1比例的GSH和GSSG组成、pH 8-10的复性液中透析,透析温度为0-10℃,透析2-8小时以获得透析产物;b)将步骤a)中的透析产物转入基本上由30-100mmol/LTris-HCl、2.8-3.3mol/L尿素、0.5-1mol/L盐酸胍、0.3-0.7mol/L L-Arg、1∶3-3∶1比例的GSH和GSSG组成、pH 8-10的复性液中透析,透析温度为0-10℃,透析2-8小时,以获得透析产物;c)将步骤b)中的透析产物转入基本上由30-100mmol/LTris-HCl、1.5-2.5mol/L尿素、0.5-1mol/L盐酸胍、0.3-0.7mol/L L-Arg、1∶3-3∶1比例的GSH和GSSG组成、pH 8-10的复性液中透析,透析温度为0-10℃,透析2-8小时,透析产物离心后获得重组牛白介素2的复性产物;其中,步骤a)和步骤b)、步骤b)和步骤c)中所用的尿素浓度之差分别为0.5-1.5mol/L。 |
地址 |
201106上海市北翟路2901号 |