黄尾鰤腹水病毒的实时定量RT-PCR快速检测方法

摘要

本发明公开了一种黄尾鰤腹水病毒的实时定量RT-PCR快速检测方法，该方法利用正向引物、反向引物和荧光探针并以体外转录RNA标准品作为逆转录和扩增的双重对照，可以对黄尾鰤腹水病毒进行定性、定量检测。本发明具有快速，准确、特异性好、灵敏度高的优点，可以应用于水产养殖场以及检验检疫部门对鱼类病毒的快速检验检疫，也可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景广泛。

主权项

1、一种黄尾鰤腹水病毒的实时定量RT-PCR快速检测方法，其特征在于首先设计特异性引物和荧光探针序列，然后提取待测样品的RNA，之后配制实时定量RT-PCR反应体系并按照反应程序进行反应，同时利用体外转录含有目的扩增片段的核糖核酸作为标准品进行反应以绘制标准曲线，最后根据待测样品的Ct值进行结果判定，其中所述的特异性引物序列和荧光探针序列如下：正向引物：5′-GGCTGATCTCACGGAAATACG-3′；反向引物：5′-GTCCCATTCAGGGCATACAGA-3′；荧光探针：5′-FAM-TCCAGAGCTCAACCCTACCCGCTG-TAMRA-3′。