α_s1-酪蛋白和κ-酪蛋白特异性抗体及试剂盒和试纸条

摘要

本发明公开了一种α_s1-酪蛋白和κ-酪蛋白特异性抗体及试剂盒和试纸条，旨在提供一种对原料乳品酪蛋白含量是否达标实现实地快速特异性检测，分辨率高，缩短检测时间。该特异性抗体通过下述方法制备：采集兔血样分离血清作为抗血清检测时的阴性对照血清；将α_s1-酪蛋白溶液与完全福氏佐剂混合得到α_s1-酪蛋白溶液；将κ-酪蛋白溶液与完全福氏佐剂混合得到κ-酪蛋白混合溶液，分别抽取两种酪蛋白溶液混合至完全乳化得到免疫注射液，进行腹部皮下5点免疫注射；初次免疫21天后进行4次加强免疫；在每次加强免疫后的7～10天抽取静脉血分离血清，测定抗血清的效价达到1∶2700以上时采血收集多克隆抗血清，分离纯化得到特异性抗体。

主权项

1、一种兔抗αs1-酪蛋白和K-酪蛋白特异性抗体，其特征在于，该αs1-酪蛋白和κ-酪蛋白特异性抗体通过下述方法制备：(1)动物的饲养与处理：新西兰大白兔，预养一周后，观察无异样，采集兔耳中央动脉血样2～3ml，将收集的血样分离血清，作为抗血清检测时的阴性对照血清；(2)初次免疫：兔子在免疫前进行编号；取αs1-酪蛋白标准样品用生理盐水溶解，配成浓度为2mg/ml的αs1-酪蛋白溶液，取K-酪蛋白标准样品用生理盐水溶解，配成浓度为2mg/ml的κ-酪蛋白溶液；将得到的αs1-酪蛋白溶液与完全福氏佐剂按照体积比为1∶1的比例混合得到αs1-酪蛋白溶液；将得到的κ-酪蛋白溶液与完全福氏佐剂按照体积比为1∶1的比例混合得到κ-酪蛋白混合溶液，用两只注射器分别抽取αs1-酪蛋白溶液和K-酪蛋白溶液相对反复抽送直至两种酪蛋白混合溶液完全乳化得到免疫注射液，对编号的新西兰大白兔进行腹部皮下5点免疫注射，每点0.2ml；(3)加强免疫：对编号的新西兰大白兔初次免疫21天后，进行第一次加强免疫，第一次加强免疫的方法为：分别用步骤2中制备的浓度为2mg/ml的αs1-酪蛋白溶液和浓度为2mg/ml的κ-酪蛋白溶液采用耳缘静脉注射免疫，免疫剂量分别为1ml/只；以后每隔7天加强免疫1次，免疫剂量与免疫方法与第一次加强免疫相同，共进行4次加强免疫；在每次加强免疫后的7～10天抽取静脉血，分离血清，用ELISA法测定抗血清的效价。(4)当用ELISA法测定抗血清的效价达到1∶2700以上时分别经心脏采血收集αs1-酪蛋白和κ-酪蛋白的多克隆抗血清；(5)用硫酸氨沉淀法对αs1-酪蛋白和κ-酪蛋白多克隆抗血清进行分离纯化，得到αs1-酪蛋白和κ-酪蛋白特异性抗体。