表达含有二硫键的蛋白质的方法

摘要

本发明涉及在原核宿主中表达真核蛋白质的方法，特别是为了保持生物活性需要形成二硫键的真核蛋白质。各种方法被使用，包括融合成硫氧还蛋白、二硫键异构酶的细胞质表达、硫氧还蛋白和/或谷胱甘肽还原酶的缺陷、蛋白酶缺陷和其类似。该方法适合表达具有生物活性的单体和二聚体形式的真核蛋白质，例如单体和二聚体形式的解联蛋白或解联蛋白结构域。包括载体、表达蛋白质的宿主细胞、表达的蛋白质和使用该蛋白质的方法。

主权项

1. 一种在原核宿主细胞内表达真核蛋白的方法，所述真核蛋白要求形成多个链间或链内二硫键以获得其生物学活性，所述的方法包括：a)用编码融合蛋白的表达载体转化原核宿主细胞，所述融合蛋白包括编码硫氧还蛋白的N端片段和编码真核蛋白的C端片段，所述真核蛋白要求形成至少两个链内或链间二硫键以获得生物学活性；和b)以生物学活性形式表达融合到所述的硫氧还蛋白的所述的真核蛋白。