| 摘要 |
1. Способ получения эмбриона представителя семейства псовых с трансплантированным ядром, включающий стадии: ! (а) энуклеации зрелого ооцита представителя семейства псовых с получением энуклеированного ооцита-реципиента; ! (б) выделения соматической клетки из ткани донора - представителя семейства псовых с получением клетки-донора ядра; ! (в) микроинъекции клетки-донора ядра со стадии (б) в энуклеированный ооцит со стадии (а) и электрического слияния клетки-донора с энуклеированным ооцитом при напряжении тока 3,0-3,5 кВ/см; и ! (г) активации слитого ооцита со стадии (в). ! 2. Способ по п.1, где зрелый ооцит представляет собой ооцит, созревший in vivo. ! 3. Способ по п.2, где ооцит, созревший in vivo, получен от представителя семейства псовых через 48-72 ч после овуляции. ! 4. Способ по п.1, где соматическая клетка на стадии (а) представляет собой клетку, выбранную из группы, состоящей из клетки кумулюса, эпителиальной клетки, фибробласта, нервной клетки, эпидермальной клетки, кератиноцита, гемопоэтической клетки, меланоцита, хондроцита, эритроцита, макрофага, моноцита, мышечной клетки, В-лимфоцита, Т-лимфоцита, эмбриональной стволовой клетки и эмбриональной клетки половой линии, клетки плода, клетки плаценты и клетки эмбриона. ! 5. Способ по п.1, где соматическая клетка представляет собой фибробласт или клетку кумулюса. ! 6. Способ по п.1, где электрическое слияние на стадии (в) проводят 1-3 раза при постоянном напряжении тока 3,0-3,5 кВ/см в течение 10-30 □. ! 7. Способ по п.1, где стадию активации на стадии (г) осуществляют путем обработки слитого ооцита одновременно или последовательно кальциевым ионофором и DMAP (6-диметиламинопурином). ! 8. Способ по п.7, где сп� |
