发明名称 表达传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的重组干酪乳杆菌及制法
摘要 本发明提供的是一种表达传染性胰腺坏死病毒(Infectious pancreas necrosis virus,IPNV)VP3蛋白的重组干酪乳杆菌及制法。根据传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR,获得含有IPNV VP3基因主要抗原位点的618bp目的片段,将扩增得到的IPNVVP3基因与表面表达的载体质粒pPG1进行连接,通过电转化进入宿主菌干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393细胞内,含阳性重组质粒pPG1-IPNV VP3的干酪乳杆菌命名为pPG1-IPNV VP3/L.casei 393。将重组pPG1-IPNV VP3/L.casei 393在乳糖的诱导下进行表达。本发明中构建了传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白干酪乳杆菌表达载体系统,表达了含有IPNV VP3蛋白主要抗原位点的约31KDa的目的蛋白,免疫印迹实验和间接免疫荧光试验均表明,所表达的外源蛋白能够与IPNV免疫血清发生反应,表明重组VP3蛋白与IPNV天然抗原一样具有相同的抗原性。
申请公布号 CN101525589A 申请公布日期 2009.09.09
申请号 CN200910071262.6 申请日期 2009.01.14
申请人 东北农业大学 发明人 刘敏;李一经;赵丽丽;赵永欣;刘巍巍
分类号 C12N1/21(2006.01)I;C12N15/34(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I;C12R1/245(2006.01)N 主分类号 C12N1/21(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 1.一种表达传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的重组干酪乳杆菌,其特征是:它是保藏在中国典型培养物保藏中心保藏编号为CCTCC M 209004的重组干酪乳杆菌。
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