变异型酶的设计法、制备法以及变异型酶

摘要

本发明提供改良水解α-1，6糖苷键的酶的新型方法。通过如下的步骤(1)和步骤(2)设计变异型酶，所述步骤(1)为，在水解α-1，6糖苷键的酶(变异对象酶)的氨基酸序列中，确定从以下组即由序列号2表示的氨基酸序列的相当于292位氨基酸的氨基酸、相当于371位氨基酸的氨基酸、相当于406位氨基酸的氨基酸、相当于407位氨基酸的氨基酸、相当于437位氨基酸的氨基酸、相当于465位氨基酸的氨基酸、相当于475位氨基酸的氨基酸、相当于476位氨基酸的氨基酸、相当于525位氨基酸的氨基酸、相当于526位氨基酸的氨基酸、相当于580位氨基酸的氨基酸和相当于582位氨基酸的氨基酸组成的组中选择的一个或两个以上的氨基酸；所述步骤(2)为，构建以变异对象酶的氨基酸序列为基础、将在步骤(1)中确定的氨基酸置换成其他氨基酸或删除而得的氨基酸序列。

主权项

1、一种变异型酶的设计法，包括以下步骤：(1)在水解α-1，6糖苷键的酶即变异对象酶的氨基酸序列中，确定从以下组即由序列号2表示的氨基酸序列的相当于292位氨基酸的氨基酸、相当于371位氨基酸的氨基酸、相当于406位氨基酸的氨基酸、相当于407位氨基酸的氨基酸、相当于437位氨基酸的氨基酸、相当于465位氨基酸的氨基酸、相当于475位氨基酸的氨基酸、相当于476位氨基酸的氨基酸、相当于525位氨基酸的氨基酸、相当于526位氨基酸的氨基酸、相当于580位氨基酸的氨基酸和相当于582位氨基酸的氨基酸组成的组中选择的一个或两个以上的氨基酸的步骤；(2)构建以变异对象酶的氨基酸序列为基础、将在步骤(1)中确定的氨基酸置换成其他氨基酸或删除而得的氨基酸序列的步骤。