一种微生物酶法生产L-色氨酸的方法

摘要

一种微生物酶法生产L-色氨酸的方法。本发明利用恶臭假单胞菌TS1138(Pseudomonas putidaTS1138)和高效表达色氨酸酶的大肠杆菌菌体的全细胞、菌体裂解液或固定化酶为酶源，从底物DL-2-氨基-Δ²-噻唑啉-4-羧酸(DL-2-amino-Δ²-thiazoline-4-carboxylic acid，DL-ATC)出发，经两步连续的或一步混合的酶促反应转化合成L-色氨酸，其纯化方法是，采用S8型大孔树脂去除含有L-色氨酸反应液中残留的DL-2-氨基-Δ²-噻唑啉-4-羧酸和吲哚，再在pH为5的条件下用NKA-II型大孔树脂吸附L-色氨酸，排除L-半胱氨酸的干扰，最后经乙醇洗脱、减压浓缩干燥，获得L-色氨酸，从而提供了一种新的L-色氨酸的绿色生产工艺路线。由于底物DL-ATC的生产成本较为低廉，因此本发明在L-色氨酸的工业化生产领域具有广阔的应用前景。

主权项

1、一种微生物酶法生产L-色氨酸的方法，其特征在于该方法包括：第1、两步连续的酶促反应第1.1、首先以恶臭假单胞菌TS1138菌体的全细胞或菌体裂解液为酶源，酶法转化底物DL-2-氨基-Δ2-噻唑啉-4-羧酸得到含有L-半胱氨酸的反应液；第1.2、再以高效表达色氨酸酶的大肠杆菌菌体的全细胞、菌体裂解液或固定化酶为酶源，以上述L-半胱氨酸反应液和吲哚为底物，经酶法转化合成L-色氨酸；或者，第2、一步混合的酶促反应以恶臭假单胞菌TS1138菌体的全细胞或菌体裂解液和高效表达色氨酸酶的大肠杆菌菌体的全细胞、菌体裂解液或固定化酶为混合酶源，酶法转化底物DL-2-氨基-Δ2-噻唑啉-4-羧酸和吲哚合成L-色氨酸。