百日咳疫苗保护性抗原的重组表达及其应用

摘要

本发明涉及通过基因工程方法从百日咳杆菌CS菌株克隆PRN、FIM2和FIM3基因，并利用表达载体获得的原核表达重组蛋白。将从百日咳杆菌CS菌株克隆得到的PRN、FIM2、FIM3基因分别亚克隆入表达载体中，并构建FIM2-FIM3融合基因表达质粒，分别在大肠杆菌中进行诱导表达。结果显示，四种重组蛋白均具有良好的免疫保护性和免疫原性，显示重组PRN和/或FIM2、FIM3可作为百日咳疫苗抗原的活性成分。

主权项

1、一种百日咳疫苗，其特征在于：其中的抗原成分含有具有免疫活性的重组蛋白PRN、FIM2蛋白、FIM3蛋白和融合蛋白FIM2-FIM3，其中所述的重组蛋白PRN的编码基因是从百日咳杆菌CS菌株中分离的，其基因序列是：1 GACTGGAACA ACCAGTCCAT CGTCAAGACC GGTGAGCGCC AGCATGGCAT CCATATCCAG61 GGCTCCGACC CGGGCGGCGT ACGGACCGCC AGCGGAACCA CCATCAAGGT AAGCGGCCGT121 CAGGCCCAGG GCATCCTGCT AGAAAATCCC GCGGCCGAGC TGCAGTTCCG GAACGGCAGT181 GTCACGTCGT CGGGACAGTT GTCCGACGAT GGCATCCGGC GCTTTCTGGG CACCGTCACC241 GTCAAGGCCG GCAAGCTGGT CGCCGATCAC GCCACGCTGG CCAACGTTGG CGACACCTGG301 GACGACGACG GCATCGCGCT CTATGTGGCC GGCGAACAGG CCCAGGCCAG CATCGCCGAC361 AGCACCCTGC AGGGCGCTGG CGGCGTGCAG ATCGAGCGCG GCGCCAATGT CACGGTCCAA421 CGCAGCGCCA TCGTCGACGG GGGCTTGCAT ATCGGCGCCC TGCAGTCATT GCAGCCGGAA481 GACCTTCCGC CCAGCCGGGT GGTGCTGCGC GACACCAACG TGACCGCCGT GCCCGCCAGC541 GGCGCGCCCG CGGCGGTGTC TGTGTTGGGG GCCAGTGAGC TTACGCTCGA CGGCGGGCAC601 ATCACCGGCG GGCGGGCAGC GGGGGTGGCG GCCATGCAAG GGGCGGTCGT GCATCTGCAG661 CGCGCGACGA TACGGCGCGG GGACGCGCCT GCCGGCGGTG CGGTTCCCGG CGGTGCGGTT721 CCCGGTGGTG CGGTTCCCGG CGGCTTCGGT CCCGGCGGCT TCGGTCCCGT CCTCGACGGC781 TGGTATGGCG TGGACGTATC GGGCTCCAGC GTGGAGCTCG CCCAGTCGAT CGTCGAGGCG841 CCGGAGCTGG GCGCCGCAAT CCGGGTGGGC CGCGGCGCCA GGGTGACGGT GTCGGGCGGC901 AGCTTGTCCG CACCGCACGG CAATGTCATC GAGACCGGCG GCGCGCGTCG CTTTGCGCCT961 CAAGCCGCGC CCCTGTCGAT CACCTTGCAG GCCGGCGCGC ATGCCCAGGG GAAAGCGCTG1021 CTGTACCGGG TCCTGCCGGA GCCCGTGAAG CTGACGCTGA CCGGGGGCGC CGATGCGCAG1081 GGCGACATCG TCGCGACGGA GCTGCCCTCC ATTCCCGGCA CGTCGATCGG GCCGCTCGAC1141 GTGGCGCTGG CCAGCCAGGC CCGATGGACG GGCGCTACCC GCGCGGTCGA CTCGCTGTCC1201 ATCGACAACG CCACCTGGGT CATGACGGAC AACTCGAACG TCGGTGCGCT ACGGCTGGCC1261 AGCGACGGCA GCGTCGATTT CCAGCAGCCG GCCGAAGCTG GGCGGTTCAA GGTCCTGACG1321 GTCAATACGC TGGCGGGTTC GGGGCTGTTC CGCATGAATG TCTTCGCGGA CCTGGGGCTG1381 AGCGACAAGC TGGTCGTCAT GCAGGACGCC AGCGGCCAGC ACAGGCTGTG GGTCCGCAAC1441 AGCGGCAGCG AGCCGGCCAG CGCCAACACC CTGCTGCTGG TGCAGACGCC ACTAGGCAGC1501 GCGGCGACCT TTACCCTTGC CAACAAGGAC GGCAAGGTCG ATATCGGTAC CTATCGCTAT1561 CGATTGGCCG CCAACGGCAA TGGGCAGTGG AGCCTGGTGG GCGCGAAGGCGCCGCCGGCG1621 CCCAAGCCCG CGCCGCAGCC GGGTCCCCAG CCGCCGCAGC CGCCGCAGCC GCAGCCGGAA1681 GCGCCGGCGC CGCAACCGCC GGCGGGCAGG GAGTTGTCCG CCGCCGCCAA CGCGGCGGTC1741 AACACGGGTG GGGTGGGCCT GGCCAGCACG CTCTGGTACG CCGAAAGCAA TGCGTTGTCC1801 AAGCGCCTGG GCGAGTTGCG CCTGAATCCG GACGCCGGCG GCGCCTGGGG CCGCGGCTTC1861 GCGCAACGCC AGCAGCTGGA CAACCGCGCC GGGCGGCGCT TCGACCAGAA GGTGGCCGGC1921 TTCGAGCTGG GCGCCGACCA CGCGGTGGCG GTGGCCGGCG GACGCTGGCA CCTGGGCGGG1981 CTGGCCGGCT ATACGCGCGG CGACCGCGGC TTCACCGGCG ACGGCGGCGGC。