ω-芋螺毒素M VII A突变体及制备和应用

摘要

本发明提供一种重组ω-芋螺毒素M VII A(CTX M VIIA)突变体，具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列，采用与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合表达的方法，在已构建的pGEX-2T/CTX M VIIA原核表达质粒基础上，在大肠杆菌中用IPTG诱导表达GST-CTX M VIIA融合蛋白，经GST亲和层析的方法纯化融合蛋白，用凝血酶进行酶切产生CTX M VIIA的突变体，产物经过凝胶柱进行分离纯化；为获得正确的二硫键配对，先用还原剂将突变体的二硫键配打开，再用PBS透析过夜，空气氧化获得目的产物。本发明方法，操作简单、质量稳定、成本较低，可在制备无成瘾型的镇痛药物中应用。

主权项

1. 一种ω-芋螺毒素M VII A突变体，其特征是：SEQ ID NO：1是所述突变体的氨基酸序列，该突变体分子中Cys3与Cys18、Cys10与Cys22、Cys17与Cys27之间分别形成三对二硫键，C-端为非酰胺化Cys，SEQ ID NO1：Gly-Ser-Cys-Lys-Gly-Lys-Gly-Ala-Lys-Cys-Ser-Arg-Leu-Met-Tyr-Asp-Cys-Cys-Thr-Gly-Ser-Cys-Arg-Ser-Gly-Lys-Cys。