一种检测纤溶酶类物质纤溶活性的试剂盒

摘要

一种检测纤溶酶类物质纤溶活性的试剂盒，首先通过离心提取牛血浆，然后加入冷硫酸铵，离心收集沉淀物；将沉淀物溶于NaCl溶液中；再加入冷硫酸铵离心，再次收集沉淀物；将沉淀物溶于pH值为7.4的PBS缓冲液中；再冷冻干燥得到牛血提取物；检测时，将牛血提取物溶于pH值为7.4的PBS缓冲液中，将琼脂粉溶于水中，然后将两种溶液混合，在55℃保温5min，趁热倒平板得到试剂盒。按照本发明的方法制备的试剂盒，不仅可以快速、灵敏、准确地检测纤溶酶类物质是否具备溶栓活性，而且可以与标准品对比，计算相对溶栓活性，具有操作简单，检测成本低廉的优点。

主权项

1、一种检测纤溶酶类物质纤溶活性的试剂盒，其特征在于：1)首先取300ml新鲜牛血液，在3500-3800r/min的转速下离心20分钟，收集血浆，并在血浆中加入500ml蒸馏水稀释；2)然后在稀释后的血浆中滴加300ml饱和度为80％的冷硫酸铵，滴加速度为2-3滴/秒，在4℃静置6-8小时后在3500-3800r/min的转速下离心15分钟，收集沉淀物；3)将沉淀物溶于150ml，0.1mol/L的NaCl溶液中，再加入300ml的蒸馏水稀释；4)然后再在稀释液中滴加200ml饱和度为80％的冷硫酸铵，滴加速度为2-3滴/秒，在4℃静置6-8小时后在3500-3800r/min的转速下离心15分钟，收集沉淀物；5)将沉淀物溶于150ml，0.2mol/L，pH值为7.4的PBS缓冲液中；6)在温度-50℃至-60℃，真空度0.08Mbar下真空冷冻干燥20-22小时得到牛血提取物；7)取0.5625-0.6875g的牛血提取物溶于37.5ml的pH值为7.4的PBS缓冲液中，取1.000-1.125g的琼脂粉溶于62.5ml水中加热至完全溶解，然后将两种溶液混合并在55℃保温5min，趁热倒平板并摇匀，得到检测试剂盒。