一种在杆状病毒—昆虫表达系统生产德国小蠊过敏原Bla g 7蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种在杆状病毒—昆虫表达系统生产德国小蠊过敏原Bla g 7蛋白的方法：从德国小蠊组织提取总RNA，反转录为cDNA，通过PCR方法获得德国小蠊过敏原Bla g 7编码基因；将该编码基因克隆到杆状病毒载体，转化昆虫细胞以表达；采用亲和层析方法进行纯化，从而到德国小蠊过敏原Bla g 7蛋白。该蛋白与国外来源的Bla g 7蛋白有2个氨基酸位点的差异。本发明方法通过杆状病毒—昆虫表达系统生产德国小蠊过敏原Bla g 7蛋白，从而避免在不同的表达系统中(例如细菌和酵母菌)对Bla g 7过敏原结构造成影响的问题，并提供一种亲和层析的方法，解决天然Bla g 7过敏原纯化工艺复杂的问题。

主权项

1、一种在杆状病毒-昆虫表达系统生产德国小蠊过敏原Blag 7蛋白的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：(1)从德国小蠊组织提取总RNA，反转录为cDNA，通过PCR方法获得德国小蠊过敏原Blag 7编码基因；(2)将该编码基因克隆到杆状病毒载体中，转化昆虫细胞以表达Blag 7蛋白；(3)采用亲和层析方法对Blag 7蛋白进行纯化，从而到德国小蠊过敏原Blag 7蛋白。