基于凝胶固定核酸的DNA固定方法及其应用

摘要

本发明涉及将DNA固定于凝胶上的方法，特别是涉及一种基于凝胶固定核酸的DNA固定方法及其应用；所述的DNA样本的固定方法包括原料选择、混合和聚合反应三个步骤；各步骤的内容如下：原料选择：选用的原料和用量是：10×TBE(pH13)：10％；40％甲基丙烯酰胺储存液：10-70％；稀释变性氨基末端修饰的核酸：1μL-5ml；N，N，N，N-四甲基乙二胺：1-10％；10％过硫酸铵：1-10％；其余为水；混合：在配置好的凝胶原料中加入氨基末端修饰的核酸进行混合，混合物中含有的核酸量为：10-1000ng/3μL；聚合反应：取5μL混合物置于PCR反应管中，37℃放置30分钟待聚合反应结束后，混合物成型成凝胶状，末端氨基修饰的核酸即通过共聚反应在凝胶中得以固定；本发明具有承载量高、末端修饰的核酸分子通过与固相载体之间形成稳定的共价键实现固定，能够经受PCR反应的剧烈条件等优点。

主权项

1. 一种基于凝胶固定核酸的DNA固定方法，其特征是包括原料选择、混合和聚合反应三个步骤；各步骤的内容如下：原料选择：选用的原料和用量是：10×TBE(pH13)：10％；40％甲基丙烯酰胺储存液：10—70％；稀释变性氨基未端修饰的核酸：1μL—5ml；N，N，N，N-四甲基乙二胺：1—10％；10％过硫酸铵：1—10％；其余为水；混合：在配置好的凝胶原料中加入氨基末端修饰的核酸进行混合，混合物中含有的核酸量为：10-1000ng/3μL；聚合反应：取5μL混合物置于PCR反应管中，37℃放置30分钟待聚合反应结束后，混合物成型成凝胶状，末端氨基修饰的核酸即通过共聚反应在凝胶中得以固定。