主权项 |
1、黄藤无性系组培繁殖方法,其特征是:1)萌蘖芽外植体的采集,在采集萌蘖芽外植体的过程中防止芽体外伤和芽心的震裂,并使萌蘖芽外植体的高度为15—40cm;2)外植体的消毒,采用两次消毒法,首先,用洗衣粉将外植体清洗干净,剥去1-2层叶鞘,用75%酒精消毒15—20秒,0.1%升汞消毒8-10分钟,无菌水漂洗1次5分钟,第二步:剥去多余叶鞘并修剪至适合于培养的大小,即萌蘖芽外植体3-4cm长、顶芽外植体5-6cm长,再用0.1%升汞消毒1-2分钟,无菌水漂洗3次,分别为5分钟、5分钟、10分钟;3)防止褐变,采用半光氨酸或抗坏血酸溶液泡洗前述萌蘖芽外植体,或采用半光氨酸和抗坏血酸混合溶液泡洗前述萌蘖芽外植体,以抑制芽外植体的褐变,所述的半光氨酸和抗坏血酸的浓度分别为2mg/L和10mg/L;4)丛芽诱导与继代增殖,丛芽诱导和继代增殖的培养基配方为:KNO3、NH4NO3、CaCl2、MgS04和KH2PO4,其配比分别为:1.5MS、0.5MS、1.0MS、1.0MS、2.5MS;丛芽诱导周期35~40天,继代培养的周期为45~50天;5)生根培养,选择高度大于2cm的芽苗进行生根培养,生根培养基为1.0mg/LNAA+2.0mg/LIBA+0.33MS大量元素+20.g/L蔗糖溶液+1.0MS微量元素+1.0MS维生素和氨基酸,生根培养的时间需要50~60天,对未生根的芽苗除去外层叶鞘后,进行第二次生根培养。 |