一种实时荧光定量PCR实验内标的设计方法

摘要

一种实时荧光定量PCR实验内标的设计方法，其包括以下步骤：(1)针对要检测的目的基因设计一套引物序列，选择对应的内标基因，其引物序列与目的基因相同；(2)设计目的基因的探针，确定浓度，在其5’端标记一个荧光报告基团；(3)设计内标基因的两种探针，一种探针针对内标基因，另一种探针则是针对目的基因的另一序列，在两种探针的5’端分别标记一个相同的荧光报告基团；(4)提取纯化目的核酸，进行实时荧光定量PCR扩增。本发明可有效监测核酸提取、扩增及产物分析中出现的误差，从而避免假阴性结果。

主权项

1、一种实时荧光定量PCR实验内标的设计方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)针对要检测的目的基因设计一套引物序列，选择对应的内标基因，其引物序列与目的基因相同；(2)设计目的基因的探针，确定浓度，在其5’端标记一个荧光报告基团；(3)设计内标基因的两种探针，一种探针针对内标基因，另一种探针则是针对目的基因的另一序列，在两种探针的5’端分别标记一个相同的荧光报告基团；(4)提取纯化目的核酸，进行实时荧光定量PCR扩增。