一种基因克隆方法

摘要

本发明提供了一种基因克隆方法，包括将相邻末端的双链DNA序列完全相同的线性载体与目的基因片断通过融合酶连接，得到环形DNA分子，然后将连接得到的DNA分子转化细菌，筛选得到正确的基因克隆。本发明提供的该克隆方法，适用于各种自备载体、插入片断和酶切位点；载体线性化(单酶切、双酶切均可)即可，不用酶切PCR产物，也不需补平末端；适用于各种PCR酶(常规Taq酶及各种高保真酶)的扩增产物；精确定向克隆；操作简单；重组效率高、转化率高；重复性高、可靠性好；还可用于高通量操作。

主权项

1、一种基因克隆方法，包括将线性载体与目的基因片断连接，得到环形DNA分子，然后将连接得到的DNA分子转化细菌，筛选得到正确的基因克隆，其特征在于：所述线性载体与目的基因的连接通过融合酶来进行，且所述线性载体和目的基因的相邻末端的双链DNA序列完全相同，其中：所述融合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，且所述末端序列完全相同的双链DNA的长度范围为13bp—22bp。