发明名称 三磷酸腺苷二钠的生产方法
摘要 本发明公开了一种三磷酸腺苷二钠的生产方法,包括反应、灭活、树脂分离、脱色、超滤、结晶等步骤。本发明采用氧化磷酸化方法,本发明工艺便于工业化大生产,操作简便、安全;收率高、转化率高,生化过程中未使用溶剂甲苯,使得废弃的酵母得到充分利用,减少了对环境的污染,保障了操作工的身体健康。
申请公布号 CN100506838C 申请公布日期 2009.07.01
申请号 CN200710019776.8 申请日期 2007.02.07
申请人 张剑 发明人 张剑
分类号 C07H19/20(2006.01)I 主分类号 C07H19/20(2006.01)I
代理机构 南通市永通专利事务所 代理人 葛 雷
主权项 1、一种三磷酸腺苷二钠的生产方法,其特征是:包括下列步骤:(1)先加自来水于反应锅中,同时开动搅拌,用夹套加热至43~45℃,然后投放蔗糖、葡萄糖、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾,使其溶解,停止加热,用循环水降温,当温度降至40-42℃以下时,投放酵母泥,并用夹套加热缓慢升温;(2)用二倍于硫酸镁体积的自来水溶解硫酸镁,另外用水:腺苷液=12:1的比例先将自来水加热至80℃,将腺苷溶解;(3)当反应锅内温度至25℃±1℃时,依次投放硫酸镁、腺苷液,并将反应料液加热至38-40℃,停止加热,保温2h,此时开始取样测定腺苷的转达化率,当反应达到三磷酸腺苷二钠一条带时,反应结束;(4)灭活、调酸碱反应结束立即放掉夹套中热水,一边通冷却水降温,一边投放冰于反应锅中,降温至6-8℃时停止加冰,用磷酸调节pH3.0~4.0,静置1小时后,再调节pH6.5~7.5,再静置30分钟后开始压榨,当反应液压榨结束后,再用纯化水顶洗滤饼,30分钟后,取水顶液检测,当三磷酸腺苷二钠浓度≤0.1%时即停止水顶,然后将水顶液与压榨液混匀,检验三磷酸腺苷二钠浓度0.5~1%、透光度≥90%方为合格,将混合液送分离工段处理;(5)树脂分离上样:将上述混合液加纯净水稀释至0.3~0.5%上树脂柱,上样8小时后每2小时检测流出液中ATP浓度,当上样流出液中ATP≥0.1%时停止上样,改水顶,2小时后再进行上样,直到上样结束;水洗杂质:上样结束,用纯化水正进洗涤至流出液A257≤0.5;然后反进水洗至树脂上层无混浊机械杂质且流出液A257≤0.5结束;稀盐洗杂质:水洗结束,用0.05%稀氯化钠溶液反进流洗,每2小时取样,测流出液中ATP浓度,当流出液中ATP浓度≥0.1%时,反进流洗杂质结束,改正进,每2小时取样,测流出液中ATP浓度,若浓度≥0.5%时,开始洗脱;洗脱:当液位降至树脂上沿20cm处时,用2%浓盐液进行洗脱,收集洗脱液,结束后送至脱色;(6)脱色:洗脱液先用二十万分子量的中空纤维超滤膜进行第一次超滤去蛋白,再添加活性炭,搅拌30分钟以上后静置30分钟,然后将脱色液送至精密过滤器超滤除热原;(7)超滤、结晶超滤:将脱色液再用纳膜式超滤器进行第二次超滤除热原,再送去结晶;结晶:超滤液先用3N盐酸调节pH至5.0,然后用夹套热水升温至30~32℃,同时开始搅拌,温度达到32℃,开始加入95%乙醇,并保持温度30-32℃,当锅内出现白色混浊时,停止加乙醇,继续搅拌半小时,然后开夹套冷却,将料液冷却至室温;离心结晶液,湿品先用乙醇淋洗,再用无水乙醇浸泡,最后离心30分钟甩干,将湿品放入湿品存入室中,母液送蒸馏回收岗位进行回收;将湿品均匀地铺入盘中,放入烘箱内,真空干燥温度控制在38~42℃,16小时后取出将其捣碎,而后每5小时翻料1次,待湿品烘至40小时后,取样品送分析室测快速失重,当快速失重<5%,即可出料;将干品放入干品存放室中保存,得产品。
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