硅基介孔分子筛SBA-15固定化酶生物催化剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种使用硅基介孔分子筛SBA-15的固定化酶生物催化剂的制备方法，属固定化酶生物催化剂制备技术领域。本发明以硅基介孔分子筛SBA-15为载体，辣根过氧化物酶为固定对象，吸附法为固定化方法，利用介孔分子筛的属性和SBA-15的孔径与辣根过氧化物酶的分子尺寸相匹配的特性，实现酶在硅基介孔分子筛SBA-15的孔道和外表面的同时固定化。本发明制备的固定化酶生物催化剂具有较好的酶分散性、较高的载酶量和较好的酶活。本发明还可适用于蛋白酶、脂肪酶等多种酶的固定化。

主权项

1. 一种硅基介孔分子筛SBA-15固定化酶生物催化剂的制备方法，其特征在于该方法具有如下工艺过程：a. 硅基介孔分子筛SBA-15的制备：将4重量份聚环氧乙烯醚—聚环氧丙烯醚—聚环氧乙烯醚三嵌段共聚物(P123)溶解于120重量份的2M的盐酸溶液和30重量份的去离子水中，然后加入8.5重量份的正硅酸乙酯(TEOS)，并在35℃下持续搅拌20h；随后将反应物转移到聚四氟乙烯内衬的反应釜中，在80℃静置条件下反应24h；最后将固体产物收集，水洗，室温干燥，在8h内将温度缓慢升至500℃，并恒温煅烧6h，得到硅基介孔分子筛SBA-15；b. 在硅基介孔分子筛上固定化酶：将步骤a制备的0.2g的硅基介孔分子筛SBA-15载体加入到10～30ml、吸附反应pH为4～12的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液中，置于磁力搅拌器上搅拌1～2h，使其在溶液中分散均匀；搅拌完毕，将1～15mg的辣根过氧化物酶加入溶液中搅拌，吸附反应时间为1～10h；随后过滤，并用二次水和磷酸盐缓冲溶液轮流反复冲洗分子筛料，最后将得到的载酶分子筛自然干燥，得到固定化酶生物催化剂。