仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法

摘要

本发明涉及一种仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法，包括：(1)将去蛹蚕茧在Na₂CO₃溶液中煮三次，洗净，于45℃烘干，将其溶解于三元溶剂，经水解，透析，冷冻干燥，得到疏松的多孔状固体丝素蛋白；(2)将上述丝素蛋白溶于六氟异丙醇，得到丝素蛋白溶液；(3)将壳聚糖溶于HFIP和TFA的混合溶剂中，得到壳聚糖溶液；(4)将丝素蛋白溶液和壳聚糖溶液混合，搅拌均匀，得到共混静电纺丝液；(5)将混合液进行静电纺丝，得到丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维。本发明的丝素蛋白/壳聚糖复合纤维的力学性能和降解行为优良，为细胞生长和组织再生提供最佳的仿生生理环境；该制备方法简单易行，易实现工业化生产。

主权项

1. 一种仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法，包括(1)丝素蛋白的提取：将去蛹蚕茧在100℃的质量百分比为0.5％Na2CO3水溶液中煮三次，每次30min，用蒸馏水充分洗净，于45℃烘干，将烘干后的蚕丝纤维以浴比1∶10溶解于三元溶剂，于70℃恒温水解1h，然后用蒸馏水透析72h，再放入—80℃预冻12h，然后在-58℃冷冻干燥，得到疏松的多孔状固体丝素蛋白；(2)制备丝素蛋白溶液：将上述丝素蛋白溶于六氟异丙醇，常温下搅拌至完全溶解，得到浓度为4-10％g/ml的丝素蛋白溶液；(3)制备壳聚糖溶液：将壳聚糖溶于六氟异丙醇HFIP和三氟乙酸TFA的混合溶剂中，搅拌至透明，得到浓度为4-8％g/ml的壳聚糖溶液；(4)制备丝素蛋白和壳聚糖的混合溶液：将丝素蛋白溶液和壳聚糖溶液按体积比0.15-2.4∶1混合，搅拌均匀，得到共混静电纺丝液；(5)将丝素蛋白和壳聚糖混合溶液进行静电纺丝，调整静电纺丝工艺参数，控制电压为12-30千伏，电场距离为60-200毫米，纺丝速率为0.5-1.5毫升/小时，得到丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维。