抗HIV-1外膜嵌合蛋白的单克隆抗体

摘要

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及到抗HIV-1外膜嵌合蛋白的单克隆抗体及其制备。根据蛋白的疏水性和保守性分析选定抗原基因，再根据抗原的免疫原性去诱导产生抗体，用已经确定的抗原位点制备单克隆抗体。一是操作简便，位点分析明确；二是某些小抗原的抗原性很强，单独与抗体就会有很强的抗原抗体结合反应。本发明选择HIV-1外膜基因的三处抗原位点较多，免疫原性较强的区域，通过原核表达体系表达抗原蛋白，得到检测灵敏度高、特异性好优势抗原用于制备抗HIV-1外膜嵌合蛋白的单克隆抗体。抗HIV-1外膜蛋白的单克隆抗体，可以用基因工程手段发酵生产，价格低，易于普及应用，可进一步用于HIV-1感染的诊断和治疗。

主权项

1、抗HIV-1外膜嵌合蛋白的单克隆抗体，其特征是：在HIV—1外膜蛋白的469-511aa，538-674aa，700-734aa这三处抗原位点较多，免疫原性较强的区域的基因，该基因由630个碱基组成，HIV—1外膜嵌合蛋白的三段基因的核苷酸序列为：atg agg gac aat tgg aga agt gaa tta tat aaa tat aaa gta gta aaa 48att gaa cca tta gga gta gca ccc acc aag gca aag aga aga gtg gtg 96cag aga gga aaa aga gca gtg gga ata gga tct aga caa ttg ttg tct 144ggt ata gtg cag cag cag aac aat ttg ctg agg gct att gag gcg caa 192cag cat ctg ttg caa ctc aca gtc tgg ggc atc aag cag ctc cag gca 240aga atc ctg gct gtg gaa aga tac cta aag gat caa cag ctc ctg ggg 288att tgg ggt tgc tct gga aaa ctc att tgc acc act gct gtg cct tgg 336aat gct agt tgg agt aat aaa tct ctg gaa cag att tgg aat cac acg 384acc tgg atg gag tgg gac aga gaa att aac aat tac aca agc tta ata 432cac tcc tta att gaa gaa tcg caa aac cag caa gaa aag aat gaa caa 480gaa tta ttg gaa tta gat aaa tgg gca agt ttg tgg aat tgg ttt aac 528ata aca aat tgg ctg gtg aat aga gtt agg cag gga tat tca cca tta 576tcg ttt cag acc cac ctc cca acc ccg agg gga ccc gac agg ccc gaa 624gga tag 630上述HIV—1外膜嵌合蛋白的三段基因的氨基酸序列为：Met Arg Asp Asn Trp Arg Ser Glu Leu Tyr Lys Tyr Lys Val Val LysIle Glu Pro Leu Gly Val Ala Pro Thr Lys Ala Lys Arg Arg Val ValGln Arg Gly Lys Arg Ala Val Gly Ile Gly Ser Arg Gln Leu Leu SerGly Ile Val Gln Vln Vln Asn Asn Leu Leu Arg Ala Ile Glu Ala GlnGln His Leu Leu Gln Leu Thr Val Trp Gly Ile Lys Gln Leu Gln AlaArg Ile Leu Ala Val Glu Arg Tyr Leu Lys Asp Gln Gln Leu Leu GlyIle Trp Gly Cys Ser Gly Lys Leu Ile Cys Thr Thr Ala Val Pro TrpAsn Ala Ser Trp Ser Asn Lys Ser Leu Glu Gln Ile Trp Asn His ThrThr Trp Met Glu Trp Asp Arg Glu Ile Asn Asn Tyr Thr Ser LeuIleHis Ser Leu Ile Glu Glu Ser Gln Asn Gln Gln Glu Lys Asn Glu GlnGlu Leu Leu Glu Leu Asp Lys Trp Ala Ser Leu Trp Asn Trp Phe AsnIle Thr Asn Trp Leu Val Asn Arg Val Arg Gln Gly Tyr Ser Pro LeuSer Phe Gln Thr His Leu Pro Thr Pro Arg Gly Pro Asp Arg Pro GluGly**终止密码子。