发明名称 PROCEDIMIENTO DE SELECCION DE AGENTES BIO-ACTIVOS POR DETECCION DE UNA VARIACION INDUCIDA DE LA CONCENTRACION INTRACELULAR DE AMPC DE UNA CELULA VIVIENTE SENSIBLE.
摘要 Procedimiento de selección de agentes, denominados agentes a probar, susceptibles de ser biológicamente activos frente a un sistema celular viviente induciendo o inhibiendo una síntesis intracelular de AMPc cuando están en presencia de al menos una célula sensible de un sistema celular viviente, en el que: - se prepara un sistema celular con excepción de un embrión humano, un cuerpo humano, un elemento no aislado del cuerpo humano o una célula de origen embrionario humano, que comprende al menos una célula viviente sensible que expresa al menos una proteína recombinada multimérica específica de la vía de transducción AMPc/PKA, * estando la citada proteína recombinada, en ausencia de síntesis inducida de AMPc, en un primer estado, denominado estado complejo, en el que forma un complejo, denominado complejo RC, que comprende al menos una sub-unidad reguladora recombinada de una PKA, denominada unidad R y que incluye al menos un sitio de enlace de la AMPc, y al menos una sub-unidad catalítica de una PKA, denominada unidad C, * estando la citada proteína recombinada, en presencia de síntesis inducida de AMPc, en un segundo estado, denominado estado disociado, en el que las unidades R y C están disociadas, y en el que al menos una unidad R fija la AMPc, - se pone el citado sistema celular en presencia de una cantidad de al menos un agente a probar, - se detecta el estado, complejo o disociado, de la citada proteína recombinada, caracterizado porque: - al menos una de las unidades R o C, denominada unidad de translocación, presenta una secuencia proteica que comprende una secuencia de direccionamiento membranar que presenta un motivo de modificación post-traduccional CAAX funcional; estando la posición de la citada secuencia de direccionamiento membranar en la citada secuencia proteica adaptada para conservar la idoneidad de la proteína recombinada para formar en la membrana un complejo RC en ausencia de síntesis inducida de AMPc, y para disociarse en presencia de síntesis inducida de AMPc; - al menos otra unidad R o C, denominada unidad marcada, distinta de la unidad de translocación, presenta un grupo, denominado grupo de detección, adaptado para: * conservar la idoneidad de la proteína recombinada para formar un complejo RC en ausencia de síntesis inducida de AMPc, y para disociarse en presencia de síntesis inducida de AMPc, y * permitir la detección del estado de la proteína con la ayuda de una señal de detección que, en la membrana, es diferente según la ausencia o la presencia de síntesis inducida de AMPc.
申请公布号 ES2318151(T3) 申请公布日期 2009.05.01
申请号 ES20030745845T 申请日期 2003.04.10
申请人 NOVALEADS 发明人 FURGER, CHRISTOPHE;LORENZO, CORINNE
分类号 G01N33/68;C12N5/08;C12N9/00;C12N9/12;C12N15/12;C12N15/62;C12Q1/48;G01N33/50;G01N33/542 主分类号 G01N33/68
代理机构 代理人
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