发明名称 玉米及其制品中腐马素产毒菌株的复合PCR检测方法
摘要 一种玉米及其制品中腐马素产毒菌株的复合PCR检测方法,基于腐马素生物合成所必须的聚酮化合物合成酶FUM1基因、丝氨酸-十六酰基转移酶基因FUM8、长寿保证因子基因FUM17,应用DNAman序列分析软件分别设计了多对引物,并与镰刀菌属特异性引物IstF/IstR一起,通过实验比较得到了特异性最佳的引物配组;在同一反应体系中同时检测腐马素产毒菌株;采用复合PCR技术,多对引物在同一反应体系中同时扩增;其检测步骤为:待检样品直接采用改良的SDS法提取模板DNA;然后经复合PCR反应后,再经电泳、染色、漂洗,接着用凝胶成像仪观察结果并拍照,最后经过谱图分析得出检测结果。提高了检测的准确性,节约了检测时间,可以试剂盒的形式大规模推广。
申请公布号 CN101418337A 申请公布日期 2009.04.29
申请号 CN200810120757.9 申请日期 2008.09.11
申请人 浙江大学 发明人 汪俏梅;魏佳;王建升;周莹;杜良成
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 杭州中成专利事务所有限公司 代理人 盛辉地
主权项 1. 一种玉米及其制品中腐马素产毒菌株的复合PCR检测方法,其特征在于:基于腐马素生物合成所必须的聚酮化合物合成酶FUM1基因、丝氨酸-十六酰基转移酶基因FUM8、长寿保证因子基因FUM17,应用DNAman序列分析软件分别设计了多对引物,并与镰刀菌属特异性引物ItsF/ItsR一起,通过实验比较得到了特异性最佳的引物配组;在同一反应体系中同时检测腐马素产毒菌株;采用复合PCR技术,多对引物在同一反应体系中同时扩增;其检测步骤为:待检样品直接采用改良的SDS法提取模板DNA;然后经复合PCR反应后,再经电泳、染色、漂洗,接着用凝胶成像仪观察结果并拍照,最后经过谱图分析得出检测结果。
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