发明名称 体外骨髓间充质干细胞扩增方法
摘要 本发明涉及细胞扩增,具体涉及一种体外骨髓间充质干细胞扩增方法。本发明所述的体外骨髓间充质干细胞扩增方法,包括以下步骤:(1)取骨髓,然后分离并收集骨髓间充质干细胞;(2)将收集的细胞重新混悬均匀,再接种、培养;(3)细胞达85%~95%融合时,对其进行消化并收集细胞,再传代培养;(4)培养3代16天后,弃去胎牛血清培养基;(5)然后用PBS冲洗,再加入含10%与骨髓来自同一主体的血清的培养基,继续培养3天;然后用胰酶消化,再用血清终止消化即可。与现有技术相比,本发明的方法具有更高的扩增效率;并且有效地解决了体外培养MSC存在的致瘤性和致敏性的问题。
申请公布号 CN101412987A 申请公布日期 2009.04.22
申请号 CN200810008030.1 申请日期 2008.03.04
申请人 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 发明人 陈兵;陆德宾;梁自文;姜友昭;李晓艳;张忠辉
分类号 C12N5/06(2006.01)I;C12N5/08(2006.01)I 主分类号 C12N5/06(2006.01)I
代理机构 北京瑞盟知识产权代理有限公司 代理人 孙民兴;顾小曼
主权项 1、一种体外骨髓间充质干细胞扩增方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取骨髓,Percoll密度梯度离心分离并收集骨髓间充质干细胞;(2)将收集的细胞用含15%胎牛血清的DMEM培养液重新混悬均匀,再接种、培养;(3)细胞达85%~95%融合时,对其进行消化并收集细胞,用全培养基重新悬浮细胞按1∶2传代培养;(4)培养3代17天后,弃去胎牛血清培养基;(5)然后用PBS冲洗,再加入含10%血清的培养基,继续培养5天;然后用胰酶消化,再用血清终止消化即可。
地址 400041重庆市沙坪坝区高滩岩30号