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Procedimiento para la preparación de variantes Y'' de una proteína Y, que comprende los pasos: (A) Disposición de un sistema de expresión in vitro que comprende (i) una secuencia de ácido nucleico S que codifica una proteína Y que se ha de modificar, (ii) una molécula diana X que es capaz de unirse a la proteína Y y/o a al menos una variante Y'' de ella, (iii) una ARN-polimerasa (Pol) que es capaz de transcribir la secuencia de ácido nucleico S, (iv) una transcriptasa inversa (TI) que es capaz de transcribir de forma inversa los transcritos de la secuencia de ácido nucleico S, en el que o bien la molécula diana X está acoplada a la Pol y la proteína Y a la TI, o bien la molécula diana X está acoplada a la TI y la proteína Y a la Pol, (B) incubación del sistema de expresión in vitro de (A) en condiciones que permitan una transcripción, una transcripción inversa y una traducción bajo la formación de variantes Y'' de la proteína Y y de secuencias de ácido nucleico S'' que las codifican, y que favorezcan la formación de variantes Y'' con propiedades de unión mejoradas para la molécula diana X, (C) aislamiento de aquellas variantes Y'' que presentan unas propiedades de unión mejoradas para la unión a X y/o asilamiento de variantes S'' de la secuencia de ácido nucleico que codifican Y''.
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