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Método de determinación de la actividad de una enzima, o el efecto que un compuesto de prueba tiene sobre la actividad de la enzima, usando espectrometría de masas mediante desorción-ionización por láser asistida por matriz o espectrometría de masas mediante desorción-ionización sobre silicio que comprende: (i) proporcionar una sonda que porta una enzima inmovilizada; (ii) introducir opcionalmente el compuesto de prueba; (iii) introducir uno o más reactivos en la enzima inmovilizada durante un tiempo, y en una forma suficiente para que tenga lugar una reacción; (iv) secar opcionalmente la sonda; (v) someter la sonda a espectrometría de masas mediante desorción-ionización por láser asistida por matriz o espectrometría de masas mediante desorción-ionización sobre silicio; (vi) determinar la actividad de la enzima, o el efecto que el compuesto de prueba tuvo sobre la actividad de la enzima, detectando la presencia y/o ausencia de uno o más productos y/o el uno o más reactivos; caracterizado porque se proporciona una capa resistente frente al enlace no específico de proteína sobre la superficie de la sonda, y en el que el espectrómetro de masas es un espectrómetro de masas mediante desorción-ionización por láser, preferiblemente un espectrómetro de masas MALDI.
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