稳定表达荧光蛋白的人肝癌高转移细胞株及其建立方法

摘要

本发明属微生物动物细胞系领域，涉及可发射高强度红色或绿色荧光，具肺与淋巴结高转移能力的人肝癌细胞系及其建立方法。本发明以肺与淋巴结高转移的人肝癌细胞系HCCLM3、HCCLM6为母细胞，通过慢病毒包装质粒对293细胞的质粒DNA共转染，获得真核表达红色或绿色荧光蛋白基因的假慢病毒颗粒，感染上述母细胞肝癌细胞株，得到染色体整合型、可稳定表达红色或绿色荧光的肺及淋巴结高转移肝癌细胞系。本发明的肺与淋巴结人高转移肝癌细胞系在体内外可作为肿瘤细胞的示踪研究、肝癌复发与转移的分子机理研究，以及抗肿瘤新药临床前期的药物疗效研究等，有广阔的应用前景。

主权项

1、稳定表达荧光蛋白的人肝癌高转移细胞株，其特征是以HCCLM3或HCCLM6为母细胞，假慢病毒转染荧光蛋白编码基因，稳定发射红色或绿色荧光，命名为红色荧光蛋白表达肝癌细胞HCCLM3-R或HCCLM6-R以及绿色荧光蛋白表达肝癌细胞HCCLM3-G或HCCLM6-G，细胞呈多边形上皮样，贴壁生长，接触性生长抑制丧失，亚三倍体核型，染色体数目50-58条，分泌AFP蛋白。